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超敏版人白細胞介素18(IL-18)ELISA檢測試劑盒原理
RENJIEBIOTM 超敏C系列ELISA試劑盒通過嚴格的性能檢測,,以滿足客戶對精確性,特異性,,準確度和靈敏度的要求。
實驗室一角:
所需要的儀器耗材:
1. 96孔讀板儀器,。
2. 自動洗板機.
3. 移液器和槍頭,。建議使用多通道移液器/排槍。
4. Eppendorf 管,。
操作步驟
1. 從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2. 設(shè)置標準品孔和樣本孔,,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL,;
3. 樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加,。
4. 除空白孔外,,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min,。
5. 棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),,靜置1min,,甩去洗滌液,,吸水紙上拍干,,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機洗板)。
6. 每孔加入底物A,、B各50μL,,37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入終止液50μL,,15min內(nèi),,在450nm波長處測定各孔的OD值。
實驗結(jié)果計算
以所測標準品的OD值為橫坐標,,標準品的濃度值為縱坐標,,在坐標紙上或用相關(guān)軟件繪制標準曲線,并得到直線回歸方程,,將樣品的OD值代入方程,,計算出樣品的濃度。
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