雞傳染性法氏囊病毒抗體（IBDV Ab）試劑盒（ELISA）檢測說明書

原理：

試劑盒采用間接法酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）,。往預先包被雞傳染性法氏囊病毒抗體（IBDV Ab）捕獲抗原的包被微孔中,，依次加入標本、標準品,、HRP標記的檢測抗體,，經(jīng)過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色,，TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的雞傳染性法氏囊病毒抗體（IBDV Ab）呈正相關,。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度（OD 值）,，計算樣品濃度。

操作步驟

1.  從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,，剩余板條用自封袋密封放回4℃,。

2.  設置標準品孔和樣本孔,，標準品孔各加不同濃度的標準品50μL；

3.  樣本孔中加入待測樣本50μL,；空白孔不加,。

4.  除空白孔外，標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標記的檢測抗體100μL,，用封板膜封住反應孔,，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。

5.  棄去液體,，吸水紙上拍干,，每孔加滿洗滌液（350μL），靜置1min,，甩去洗滌液,，吸水紙上拍干，如此重復洗板5次（也可用洗板機洗板）,。

6.  每孔加入底物A,、B各50μL，37℃避光孵育15min,。

  每孔加入終止液50μL,，15min內(nèi),，在450nm波長處測定各孔的OD值,。

 檢測范圍：6.25 ng/mL~ 200 ng/mL。

需要而未提供的試劑和器材

1. 酶標儀（450nm）

2. 高精度加樣器及槍頭：0.5-10uL,、2-20uL,、20-200uL、200-1000uL

3. 37℃恒溫箱

4. 蒸餾水或去離子水