實驗方法-人纖維膠凝蛋白2ELISA檢測試劑盒

所需試劑和器材： 　

1.酶標(biāo)儀（450nm）

2.高精度加樣器及槍頭：0.5-10uL、2-20uL,、20-200uL,、200-1000uL

3.37℃恒溫箱

4.蒸餾水或去離子水

(1)、高效,、靈敏,、特異的抗體；

(2),、穩(wěn)定的重復(fù)性和可靠性,；

(3),、吸附性能好，空白值低,，孔底透明度高的固相載體,；

(4)、適用血清,、血漿,、組織勻漿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液,、尿液等等多種標(biāo)本類型,；

(5)、節(jié)省實驗經(jīng)費(fèi),。

檢測種屬：人,、大小鼠、兔,、羊,、猴、豬,、豚鼠ELISA檢測試劑盒等種屬,。

洗板方法
1. 手工洗板：甩盡孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液,，靜置1min后甩盡孔內(nèi)液體,，在吸水紙上拍干，如此洗板5次,。
2. 自動洗板機(jī)：每孔注入洗液350μL，浸泡1min,，洗板5次,。
操作步驟
1. 從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃,。
2. 設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,，標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL；
3. 樣本孔先加待測樣本10μL,，再加樣本稀釋液40μL,；空白孔不加。
4. 除空白孔外,，標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標(biāo)記的檢測抗體100μL,，用封板膜封住反應(yīng)孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min,。
5. 棄去液體,，吸水紙上拍干,，每孔加滿洗滌液，靜置1min,，甩去洗滌液,，吸水紙上拍干，如此重復(fù)洗板5次（也可用洗板機(jī)洗板）,。
6. 每孔加入底物A,、B各50μL，37℃避光孵育15min,。
7. 每孔加入終止液50μL,，15min內(nèi)，在450nm波長處測定各孔的OD值,。