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人催乳素ELISA檢測試劑盒操作程序
儲存及有效期:
未開封的試劑盒:所有試劑均按試劑瓶標簽上所示保存。請注意,收到試劑盒后請盡快將TMB 洗滌液,,終止液保存于4℃,其他試劑保存于-20℃,。
使用后的試劑盒:剩余試劑仍需按照試劑瓶標簽所示的溫度保存,,開封后的酶標板要加干燥劑后密封保存于-20℃,避免潮濕,。
實驗原理:
將目標抗體包被于96孔微孔板中,,制成固相載體,向微孔中分別加入標準品或標本,,其中的目標連接于固相載體上的抗體結合,,然后加入微生物化的目標抗體,,將未結合的生物素抗體洗凈后,加入HRP標記和親和素,,再次*洗滌后加入TMB底物顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,,并在酸的作用下轉化成zui終的黃色,。顏色的深淺和樣品中的目標呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(O.D.值),,計算樣品濃度,。
精密度:
精密度用樣品測定值的變異系數CV表示。CV(%)=SD/mean×100
批內差:取同批次試劑盒對低,、中,、高值定值樣本進行定量檢測,每份樣本連續(xù)測定20次,,分別計算不同濃度樣本的平均值及SD值,。
批間差:選取3個不同批次的試劑盒分別對低、中,、高值定值樣本定量測定,,每個樣本使用同一試劑盒重復測定8次,分別計算不同濃度樣本的平均值及SD值,。
批內差: CV<10% Inter-批間差: CV<13%
穩(wěn)定性:
經測定,,試劑盒在有效期內按推薦溫度保存,其活性降低率小于5%,。
為減小外部因素對試劑盒破壞前后檢測值的影響,,實驗室的環(huán)境條件需盡量保持一致,尤其是實驗室內溫度,、濕度及溫育條件,。其次由同一實驗員來進行操作可減少人為誤差。
友情提醒:
試劑盒使用完畢后,,請妥善處理相關耗材,,避免環(huán)境污染!
人催乳素ELISA檢測試劑盒操作程序
操作時應注意:
A. 使用移液器加液與移液槍頭不能混用,。
B. 洗板要干凈,,避免交叉污染。
C. 嚴格按照試劑盒的說明書操作,,反應時間準確,。
D. 請勿將樣品或試劑灑到儀器表面或內部,操作完成注意做好清潔工作,。
E. 不要在測量過程中關閉電源,。
F. 對于因試劑盒問題造成的測量結果的偏差,,應根據實際情況及時修改酶免測定試劑盒參數,以達到zui佳效果,。
G. 使用后蓋好防塵罩,。
H. 出現技術故障時應及時與廠家,切勿擅自拆卸酶標儀,。
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