小鼠MMP-9ELISA檢測試劑盒說明書-測定

實驗原理

用純化的抗體包被微孔板,，制成固相載體,，往包被抗C3抗體的微孔中依次加入標本或標準品,、生物素化的抗C3抗體、HRP標記的親和素,，經(jīng)過*洗滌后用底物TMB顯色,。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色,。顏色的深淺和樣品中的C3呈正相關(guān),。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值)，計算樣品濃度,。

標本的采集及保存

1. 血清：全血標本請于室溫放置2小時或4℃過夜后于1000 x g離心20分鐘,，取上清即可檢測，或?qū)吮痉庞?20℃或-80℃保存,，但應(yīng)避免反復凍融,。

2. 血漿：可用EDTA或肝素作為抗凝劑，標本采集后30分鐘內(nèi)于2 - 8° C 1000 x g離心15分鐘,，或?qū)吮痉庞?20℃或-80℃保存,，但應(yīng)避免反復凍融。

3. 細胞培養(yǎng)物上清或其它生物標本：請1000 x g離心20分鐘,，取上清即可檢測,，或?qū)吮痉庞?20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復凍融,。

4. 樣本處理：血清或血漿標本推薦稀釋10,000倍,。

小鼠MMP-9ELISA檢測試劑盒說明書-測定

ELISA試劑盒操作注意事項：

1）試劑應(yīng)按標簽說明書儲存，使用前恢復到室溫,。稀稀過后的標準品應(yīng)丟棄,，不可保存。

2）實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,，密封保存,，以免變質(zhì)。

3）不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用,。保質(zhì)前使用,。

4）使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A,、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器,。

5）使用干凈的塑料容器配置洗滌液,。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。

6）洗滌酶標板時應(yīng)充分拍干,，不要將吸水紙直接放入酶標反應(yīng)孔中吸水,。

7）底物A應(yīng)揮發(fā)，避免長時間打開蓋子,。底物B對光敏感,，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,，有毒,。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。

8）加入試劑的順序應(yīng)一致,，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣,。

9）按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作