1、血清：操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,。收集血液后，1000×g離心10分鐘將血紅細(xì)胞迅速小心地分離,。
2,、血漿：EDTA、檸檬酸鹽,、肝素血漿可用于檢測,。1000×g離心30分鐘去除顆粒,。
3、細(xì)胞上清液：1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物,。
4,、組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,，取上清液,。
5、保存：如果樣品不立即使用,，應(yīng)將其分成小部分-70℃保存,，避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血,。如果血清中大量顆粒,，檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍,。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍,。

 實(shí)驗(yàn)原理
用純化的抗體包被微孔板，制成固相載體,，往包被抗C3抗體的微孔中依次加入標(biāo)本或標(biāo)準(zhǔn)品,、生物素化的抗C3抗體、HRP標(biāo)記的親和素,，經(jīng)過*洗滌后用底物TMB顯色,。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成z終的黃色,。顏色的深淺和樣品中的C3呈正相關(guān),。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值)，計(jì)算樣品濃度,。

標(biāo)本的采集及保存
1. 血清：全血標(biāo)本請(qǐng)于室溫放置2小時(shí)或4℃過夜后于1000 x g離心20分鐘,，取上清即可檢測，或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存,，但應(yīng)避免反復(fù)凍融,。
2. 血漿：可用EDTA或肝素作為抗凝劑，標(biāo)本采集后30分鐘內(nèi)于2 - 8° C 1000 x g離心15分鐘,，或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存,，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
3. 細(xì)胞培養(yǎng)物上清或其它生物標(biāo)本：請(qǐng)1000 x g離心20分鐘,，取上清即可檢測,，或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
4. 樣本處理：血清或血漿標(biāo)本推薦稀釋10,000倍,。
注：以上標(biāo)本置4℃保存應(yīng)小于1周,，-20℃或-80℃均應(yīng)密封保存，-20℃不應(yīng)超過1個(gè)月,，-80℃不應(yīng)超過2個(gè)月,；標(biāo)本溶血會(huì)影響檢測結(jié)果，因此溶血標(biāo)本不宜進(jìn)行此項(xiàng)檢測,。

操作技巧：
A,、加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。
B,、合理安排檢測量,，以免反應(yīng)板過多造成洗板等待時(shí)間長,。
C,、吸取液體時(shí)，要用量程和需要量接近的槍去吸,，減少誤差,。
D、要盡量做雙孔實(shí)驗(yàn),，這樣才既能保證數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性,，又能反映出試劑盒的精密度。
E,、樣品稀釋液應(yīng)用加液器加注,，并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性。