1,、血清：操作過程中避免任何細胞刺激,。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,，1000×g離心10分鐘將血紅細胞迅速小心地分離,。
2、血漿：EDTA,、檸檬酸鹽,、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒,。
3,、細胞上清液：1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4,、組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎,。1000×g離心10分鐘，取上清液,。
5,、保存：如果樣品不立即使用，應將其分成小部分-70℃保存,，避免反復冷凍,。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,，檢測前先離心或過濾,。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍,。

 實驗原理
用純化的抗體包被微孔板,，制成固相載體，往包被抗C3抗體的微孔中依次加入標本或標準品,、生物素化的抗C3抗體,、HRP標記的親和素，經(jīng)過*洗滌后用底物TMB顯色,。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成z終的黃色,。顏色的深淺和樣品中的C3呈正相關(guān),。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),，計算樣品濃度。

標本的采集及保存
1. 血清：全血標本請于室溫放置2小時或4℃過夜后于1000 x g離心20分鐘,，取上清即可檢測,，或?qū)吮痉庞?20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融,。
2. 血漿：可用EDTA或肝素作為抗凝劑,，標本采集后30分鐘內(nèi)于2 - 8° C 1000 x g離心15分鐘，或?qū)吮痉庞?20℃或-80℃保存,，但應避免反復凍融,。
3. 細胞培養(yǎng)物上清或其它生物標本：請1000 x g離心20分鐘，取上清即可檢測,，或?qū)吮痉庞?20℃或-80℃保存,，但應避免反復凍融。
4. 樣本處理：血清或血漿標本推薦稀釋10,000倍,。
注：以上標本置4℃保存應小于1周,，-20℃或-80℃均應密封保存，-20℃不應超過1個月,，-80℃不應超過2個月,；標本溶血會影響檢測結(jié)果，因此溶血標本不宜進行此項檢測,。

操作技巧：
A,、加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
B,、合理安排檢測量,，以免反應板過多造成洗板等待時間長。
C,、吸取液體時,，要用量程和需要量接近的槍去吸，減少誤差,。
D,、要盡量做雙孔實驗，這樣才既能保證數(shù)據(jù)的準確性,，又能反映出試劑盒的精密度,。
E、樣品稀釋液應用加液器加注,，并經(jīng)常校對其準確性,。