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人Flag標簽ELISA試劑盒,,(Flag-tag)酶免檢測
人Flag標簽(Flag-tag)ELISA試劑盒僅供科研使用
實驗原理:
試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA),。往預(yù)先包被人Flag標簽(Flag-tag)捕獲抗體的包被微孔中,,依次加入標本、標準品,、HRP標記的檢測抗體,,經(jīng)過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色,,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的人Flag標簽(Flag-tag)呈正相關(guān),。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),,計算樣品濃度。
試劑盒組成:
試劑盒操作步驟:
實驗所需自備試驗器材:
1. 酶標儀(450nm)
2. 高精度加樣器及槍頭:0.5-10uL,、2-20uL,、20-200uL、200-1000uL
3. 37℃恒溫箱
4. 蒸餾水或去離子水
實驗結(jié)果計算:
繪制標準曲線:在Excel工作表中,,以標準品濃度作橫坐標,,對應(yīng)OD值作縱坐標,繪制出標準品線性回歸曲線,按曲線方程計算各樣本濃度值,。
試劑盒性能:
1. 檢測范圍:0.625 ng/ml - 20 ng/ml
2. 靈敏度:低檢測濃度小于0.1 ng/ml
3. 特異性:不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng),。
4. 重復(fù)性:板內(nèi)變異系數(shù)小于10% ,板間變異系數(shù)小于15% ,。
技術(shù)小提示:
1. 當混合或重溶蛋白溶液時,,盡量避免起沫。
2. 為了避免交叉感染,,配置不同濃度標準品,、上樣、加不同試劑都需要更換槍頭,。另外不同試劑請分別使用不同的移液槽,。
3. 每次孵育時,請正確使用封板膠可保證結(jié)果的準確性,。
4. 混合后的顯色底物在上板前應(yīng)為無色,,請避光保存;假如微孔板后,,將由物色變成不同深度的藍色,。
5. 終止液上板順序應(yīng)同顯色底物上板順序一致;加入終止液后,,孔內(nèi)顏色由藍變黃,;若孔內(nèi)有綠色,則表明孔內(nèi)液體未混勻,;請充分混合,。
產(chǎn)品有效期:6個月
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