人HO-1 ELISA檢測試劑盒檢測的樣本：血清,、血漿,、組織、細胞等

實驗原理

試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）,。往預先包被人血紅素氧合酶1（HO-1）捕獲抗體的包被微孔中,，依次加入標本、標準品,、HRP標記的檢測抗體,，經(jīng)過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色,，TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,，并在酸的作用下轉化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的人血紅素氧合酶1（HO-1）呈正相關,。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度（OD 值），計算樣品濃度。

操作步驟

1.   從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,，剩余板條用自封袋密封放回4℃,。
2.   設置標準品孔和樣本孔，標準品孔各加不同濃度的標準品50μL,；
3.   樣本孔中加入待測樣本50μL,；空白孔不加。
4.   除空白孔外,，標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標記的檢測抗體100μL,，用封板膜封住反應孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min,。
5.   棄去液體,，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液（350μL）,，靜置1min,，甩去洗滌液，吸水紙上拍干,，如此重復洗板5次（也可用洗板機洗板）,。
6.   每孔加入底物A、B各50μL,，37℃避光孵育15min,。
7.   每孔加入終止液50μL，15min內(nèi),，在450nm波長處測定各孔的OD值,。

試劑盒性能

•  檢測范圍：2 U/L – 64 U/L。
•  靈敏度：低檢測濃度小于0.1 U/L,。
•  特異性：不與其它可溶性結構類似物交叉反應,。
•  重復性：板內(nèi)變異系數(shù)小于10% ，板間變異系數(shù)小于15% ,。