間接膽紅素(IBIL)ELISA檢測試劑盒操作原理,，種屬：小鼠

實驗原理

試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）。往預先包被小鼠間接膽紅素（IBIL）捕獲抗體的包被微孔中,，依次加入標本,、標準品、HRP標記的檢測抗體,，經(jīng)過溫育并*洗滌,。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色,。顏色的深淺和樣品中的小鼠間接膽紅素（IBIL）呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度（OD 值）,，計算樣品濃度,。

小鼠間接膽紅素(IBIL)ELISA試劑盒 英文名稱：Mouse IBIL ELISA Kit 實驗類型：夾心法 檢測范圍：0.25 μmol/L – 8 μmol/L 低檢測限：0.1 μmol/L 應(yīng)用范圍：血清、血漿,、組織勻漿,、細胞培養(yǎng)物上清或其它相關(guān)液體（本產(chǎn)品僅供實驗室科研及非臨床用途）

小鼠間接膽紅素(IBIL)ELISA試劑盒組成

操作步驟

1. 從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃,。

2. 設(shè)置標準品孔和樣本孔,，標準品孔各加不同濃度的標準品50μL；

3. 樣本孔中加入待測樣本50μL,；空白孔不加,。

4. 除空白孔外，標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標記的檢測抗體100μL,，用封板膜封住反應(yīng)孔,，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。

5. 棄去液體,，吸水紙上拍干,，每孔加滿洗滌液（350μL），靜置1min,，甩去洗滌液,，吸水紙上拍干，如此重復洗板5次（也可用洗板機洗板）,。

6. 每孔加入底物A,、B各50μL,，37℃避光孵育15min,。

7. 每孔加入終止液50μL，15min內(nèi),，在450nm波長處測定各孔的OD值,。