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間接膽紅素(IBIL)ELISA檢測(cè)試劑盒操作原理,,種屬:小鼠

時(shí)間:2018/9/5閱讀:2367

間接膽紅素(IBIL)ELISA檢測(cè)試劑盒操作原理,,種屬:小鼠

實(shí)驗(yàn)原理

試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)。往預(yù)先包被小鼠間接膽紅素(IBIL)捕獲抗體的包被微孔中,,依次加入標(biāo)本,、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體,,經(jīng)過(guò)溫育并*洗滌,。用底物TMB顯色,TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色,。顏色的深淺和樣品中的小鼠間接膽紅素(IBIL)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD 值),,計(jì)算樣品濃度,。

 

小鼠間接膽紅素(IBIL)ELISA試劑盒

英文名稱:Mouse IBIL ELISA Kit
實(shí)驗(yàn)類(lèi)型:夾心法
檢測(cè)范圍:0.25 μmol/L – 8 μmol/L
低檢測(cè)限:0.1 μmol/L
應(yīng)用范圍:血清、血漿,、組織勻漿,、細(xì)胞培養(yǎng)物上清或其它相關(guān)液體(本產(chǎn)品僅供實(shí)驗(yàn)室科研及非臨床用途)

小鼠間接膽紅素(IBIL)ELISA試劑盒組成

試劑盒組成96孔配置48孔配置備注
微孔酶標(biāo)板8孔×12條8孔×6條 無(wú)
標(biāo)準(zhǔn)品0.3mL×6管0.3mL×6管無(wú)
樣本稀釋液6mL3mL無(wú)
檢測(cè)抗體-HRP10mL5mL無(wú)
20×洗滌緩沖液25mL15mL按說(shuō)明書(shū)進(jìn)行稀釋
底物A6mL3mL無(wú)
底物B6mL3mL無(wú)
終止液6mL3mL無(wú)
封板膜2張2張無(wú)
說(shuō)明書(shū)1份1份無(wú)
自封袋1個(gè)1個(gè)無(wú)
 

 

操作步驟

1. 從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃,。

2. 設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL;

3. 樣本孔中加入待測(cè)樣本50μL,;空白孔不加,。

4. 除空白孔外,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過(guò)氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測(cè)抗體100μL,,用封板膜封住反應(yīng)孔,,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min,。

5. 棄去液體,吸水紙上拍干,,每孔加滿洗滌液(350μL),,靜置1min,甩去洗滌液,,吸水紙上拍干,,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機(jī)洗板)。

6. 每孔加入底物A,、B各50μL,,37℃避光孵育15min。

7. 每孔加入終止液50μL,,15min內(nèi),,在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。

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