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上海仁捷生物科技有限公司

MYHC ELISA檢測(cè)試劑盒(種屬檢測(cè):鴨)

時(shí)間:2018/8/14閱讀:2683

鴨肌球蛋白重鏈(MYHC)ELISA試劑盒

英文名稱(chēng):Duck MYHC ELISA Kit
實(shí)驗(yàn)類(lèi)型:夾心法
檢測(cè)范圍:12.5 pg/mL – 400 pg/mL
低檢測(cè)限:1.0 pg/mL
應(yīng)用范圍:血清,、血漿,、組織勻漿,、細(xì)胞培養(yǎng)物上清或其它相關(guān)液體(本產(chǎn)品僅供實(shí)驗(yàn)室科研及非臨床用途)

操作步驟

1. 從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃,。

2. 設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL;

3. 樣本孔中加入待測(cè)樣本50μL,;空白孔不加,。

4. 除空白孔外,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過(guò)氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測(cè)抗體100μL,,用封板膜封住反應(yīng)孔,,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。

5. 棄去液體,,吸水紙上拍干,,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,,甩去洗滌液,,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機(jī)洗板),。

6. 每孔加入底物A,、B各50μL,37℃避光孵育15min,。

7. 每孔加入終止液50μL,,15min內(nèi),在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值,。

 

 

注意事項(xiàng)

1. 嚴(yán)格按照規(guī)定的時(shí)間和溫度進(jìn)行溫育以保證準(zhǔn)確結(jié)果,。所有試劑都必須在使用前達(dá)到室溫20-25℃。使用后立即冷藏保存試劑,。

2. 洗板不正確可以導(dǎo)致不準(zhǔn)確的結(jié)果,。在加入底物前確保盡量吸干孔內(nèi)液體。溫育過(guò)程中不要讓微孔干燥掉,。

3. 消除板底殘留的液體和手指印,,否則影響OD值。

4. 底物顯色液應(yīng)呈無(wú)色或很淺的顏色,,已經(jīng)變藍(lán)的底物液不能使用,。

5. 避免試劑和標(biāo)本的交叉污染以免造成錯(cuò)誤結(jié)果。

6. 在儲(chǔ)存和溫育時(shí)避免強(qiáng)光直接照射,。

7. 平衡至室溫后再打開(kāi)密封袋以防水滴凝聚在冷板條上,。

8. 任何反應(yīng)試劑不能接觸漂白溶劑或漂白溶劑所散發(fā)的強(qiáng)烈氣體。任何漂白成分都會(huì)破壞試劑盒中反應(yīng)試劑的生物活性,。

9. 不能使用過(guò)期產(chǎn)品,。

10. 如果可能傳播疾病,,所有的樣品都應(yīng)管理好,按照規(guī)定的程序處理樣品和檢測(cè)裝置,。

 

 

洗板方法

手工洗板方法:吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標(biāo)板內(nèi)的液體,;在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上鋪墊幾層吸水紙,酶標(biāo)板朝下用力拍幾次,;將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用,。根據(jù)需要,重復(fù)此過(guò)程數(shù)次,。

自動(dòng)洗板:如果有自動(dòng)洗板機(jī),,應(yīng)在熟練使用后再用到正式實(shí)驗(yàn)過(guò)程中。

 

 

實(shí)驗(yàn)結(jié)果計(jì)算

以所測(cè)標(biāo)準(zhǔn)品的OD值為橫坐標(biāo),,標(biāo)準(zhǔn)品的濃度值為縱坐標(biāo),,在坐標(biāo)紙上或用相關(guān)軟件繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,并得到直線回歸方程,,將樣品的OD值代入方程,,計(jì)算出樣品的濃度。

Elisa試劑盒標(biāo)準(zhǔn)曲線圖

(此圖僅供參考)

 

 

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