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上海仁捷生物科技有限公司

(AGT)ELISA檢測,犬血管緊張素原ELISA試劑盒操作步驟

時間:2018/8/3閱讀:2704

犬血管緊張素原(AGT)ELISA試劑盒

英文名稱:Canine AGT ELISA Kit
實驗類型:夾心法
檢測范圍:12.5 pg/mL – 400 pg/mL
低檢測限:1.0 pg/mL
應(yīng)用范圍:血清,、血漿,、組織勻漿、細(xì)胞培養(yǎng)物上清或其它相關(guān)液體(本產(chǎn)品僅供實驗室科研及非臨床用途)

操作步驟

1. 從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,,剩余板條用自封袋密封放回4℃,。

2. 設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL,;

3. 樣本孔中加入待測樣本50μL,;空白孔不加。

4. 除空白孔外,,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測抗體100μL,,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min,。

5. 棄去液體,,吸水紙上拍干,,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,,甩去洗滌液,,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機(jī)洗板),。

6. 每孔加入底物A,、B各50μL,37℃避光孵育15min,。

7. 每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),,在450nm波長處測定各孔的OD值,。

注意事項

1. 嚴(yán)格按照規(guī)定的時間和溫度進(jìn)行溫育以保證準(zhǔn)確結(jié)果。所有試劑都必須在使用前達(dá)到室溫20-25℃,。使用后立即冷藏保存試劑,。

2. 洗板不正確可以導(dǎo)致不準(zhǔn)確的結(jié)果。在加入底物前確保盡量吸干孔內(nèi)液體,。溫育過程中不要讓微孔干燥掉,。

3. 消除板底殘留的液體和手指印,否則影響OD值,。

4. 底物顯色液應(yīng)呈無色或很淺的顏色,,已經(jīng)變藍(lán)的底物液不能使用。

5. 避免試劑和標(biāo)本的交叉污染以免造成錯誤結(jié)果,。

6. 在儲存和溫育時避免強光直接照射,。

7. 平衡至室溫后再打開密封袋以防水滴凝聚在冷板條上。

8. 任何反應(yīng)試劑不能接觸漂白溶劑或漂白溶劑所散發(fā)的強烈氣體,。任何漂白成分都會破壞試劑盒中反應(yīng)試劑的生物活性,。

9. 不能使用過期產(chǎn)品。

10. 如果可能傳播疾病,,所有的樣品都應(yīng)管理好,,按照規(guī)定的程序處理樣品和檢測裝置。

 

洗板方法

手工洗板方法:吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標(biāo)板內(nèi)的液體,;在實驗臺上鋪墊幾層吸水紙,,酶標(biāo)板朝下用力拍幾次;將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用,。根據(jù)需要,,重復(fù)此過程數(shù)次。

自動洗板:如果有自動洗板機(jī),,應(yīng)在熟練使用后再用到正式實驗過程中,。

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