大鼠ELISA試劑盒本辦法要著重留意的是RF(1gM類)及其他非特異IgM的攪擾。RF(1gM類)因為其能與固相抗人u鏈抗體,，并可與隨后參加的酶標(biāo)抗體(動物IgG)反響，然后導(dǎo)致假陽性反響,。而非特異IgM因為其在*步溫育中,，可與特異IgM競爭與固相抗體，所以會影響測定的靈敏度,。因而,，運(yùn)用本法測IgM，必須對臨床樣本進(jìn)行恰當(dāng)稀釋,。樣本稀釋后,，大鼠ELISA試劑盒上述產(chǎn)生攪擾效果的非特異IgM含量削減，而特異IgM因為處于相應(yīng)病原體的急染期,，滴度很高,，必定稀釋后，不會有顯著影響,，況且,，在某些病原體如HBV的慢染期間，IgM類特異抗體也能繼續(xù)存在,，只不過滴度要低許多,。
因而，在運(yùn)用直接法測定IgM抗體時,，一般須將血清樣本用抗人IgG抗體或A預(yù)處理，以去掉IgG的攪擾,。這么不但測定較為繁瑣,，并且影響測定的特異性和靈敏度。現(xiàn)在,，常用的IgM抗體檢查辦法為捕獲法,，即以抗人IgM抗體(抗人u鏈)作為固相抗體，大鼠ELISA試劑盒當(dāng)參加血清標(biāo)本時,，其間的IgM類抗體(特異的和非特異的)即可被固相抗體捕獲,，再參加特異抗原，其與固相上捕獲的IgM抗體后,，參加酶標(biāo)抗特異抗原的抗體,，zui終參加底物顯色,。
大鼠ELISA試劑盒具體操作步驟如下：
1．首先將抗人IgMbt鏈抗體于碳酸鹽緩沖液中40c下過夜包被聚苯乙烯等固相，構(gòu)成固相抗體,，洗刷去掉未與固相或不緊的抗體后,，用小牛血清或牛血清白蛋白等封閉，洗刷去掉未的部分及雜質(zhì),。
2．參加含待測IgM抗體的臨床樣本如血清等,，溫育必定時刻后洗板；此刻,，待測樣本中的IgM抗體就會與固相上的抗P鏈抗體反響而吸附于固相上,。
3．參加特異的抗原如HAV抗原、HBcAg等,，溫育必定時刻后洗板,；此刻，特異抗原就會與固相上的特異IgM抗體發(fā)生反響,。
4．參加酶符號的抗特異抗原的抗體,，溫育必定時刻后洗板；此刻,，在固相上即構(gòu)成相應(yīng)的抗原抗體復(fù)合物,。