大鼠ELISA試劑盒本辦法要著重留意的是RF(1gM類)及其他非特異IgM的攪擾。RF(1gM類)因為其能與固相抗人u鏈抗體,，并可與隨后參加的酶標抗體(動物IgG)反響，然后導(dǎo)致假陽性反響,。而非特異IgM因為其在*步溫育中,，可與特異IgM競爭與固相抗體，所以會影響測定的靈敏度,。因而,，運用本法測IgM，必須對臨床樣本進行恰當稀釋,。樣本稀釋后,，大鼠ELISA試劑盒上述產(chǎn)生攪擾效果的非特異IgM含量削減，而特異IgM因為處于相應(yīng)病原體的急染期,，滴度很高,，必定稀釋后，不會有顯著影響,，況且,，在某些病原體如HBV的慢染期間，IgM類特異抗體也能繼續(xù)存在,，只不過滴度要低許多,。
因而，在運用直接法測定IgM抗體時,，一般須將血清樣本用抗人IgG抗體或A預(yù)處理,，以去掉IgG的攪擾。這么不但測定較為繁瑣,，并且影響測定的特異性和靈敏度?，F(xiàn)在，常用的IgM抗體檢查辦法為捕獲法,，即以抗人IgM抗體(抗人u鏈)作為固相抗體,，大鼠ELISA試劑盒當參加血清標本時,，其間的IgM類抗體(特異的和非特異的)即可被固相抗體捕獲，再參加特異抗原,，其與固相上捕獲的IgM抗體后,，參加酶標抗特異抗原的抗體，zui終參加底物顯色,。
大鼠ELISA試劑盒具體操作步驟如下：
1．首先將抗人IgMbt鏈抗體于碳酸鹽緩沖液中40c下過夜包被聚苯乙烯等固相,，構(gòu)成固相抗體，洗刷去掉未與固相或不緊的抗體后,，用小牛血清或牛血清白蛋白等封閉,，洗刷去掉未的部分及雜質(zhì)。
2．參加含待測IgM抗體的臨床樣本如血清等,，溫育必定時刻后洗板,；此刻，待測樣本中的IgM抗體就會與固相上的抗P鏈抗體反響而吸附于固相上,。
3．參加特異的抗原如HAV抗原,、HBcAg等，溫育必定時刻后洗板,；此刻,，特異抗原就會與固相上的特異IgM抗體發(fā)生反響。
4．參加酶符號的抗特異抗原的抗體,，溫育必定時刻后洗板,；此刻，在固相上即構(gòu)成相應(yīng)的抗原抗體復(fù)合物,。