ELISA實驗以靈敏度較高,、特異性較好的特點在科研上得到了廣泛的應(yīng)用，但操作中的各個環(huán)節(jié)對試驗的檢測效果影響較大,，如不注意,，有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果,。  下面將操作中各個環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題解決辦法總結(jié)如下：試劑要選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑,，嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘,。標(biāo)本收集與保存：避免使用肉眼可見的溶血標(biāo)本,、高脂標(biāo)本和混濁標(biāo)本；2-8℃下,，標(biāo)本可放置24-48小時,，長期保存需放置-20℃下，請避免反復(fù)凍融,。  
具體請參照：       
1.洗滌液：用前配制,，有的試劑盒會標(biāo)明，配好的4度下一般可以放一個月,，如果沒有標(biāo)明,，盡量用新鮮的，不要多配制,；
2.顯色液（有A液和B液的）,，用前15分鐘配制；  
3.標(biāo)準(zhǔn)品：有的試劑盒中標(biāo)準(zhǔn)品是已經(jīng)配制好的,，4度保存,，有的是要現(xiàn)配制的,，按照說明書操作；  
4.濃縮生物素結(jié)合的二抗和HRP：如果需要配制,，試劑盒沒注明配好可以保存多久的話,，盡量現(xiàn)配現(xiàn)用（用前15分鐘配制）；原則是試劑盒上沒有指出配制物的儲藏方式的話,，應(yīng)該現(xiàn)配現(xiàn)用,；不要怕麻煩；還有小瓶的管子開蓋前要離心,，以免蓋子上粘連以后總量不夠,；
5.加 樣：室溫溫育的試劑，特別是溫育時間比較短的實驗操作的試劑,，加樣對數(shù)據(jù)的影響比較大,，特別要注意加樣問題。  
不好的操作原因：不會正確使用加樣器,； 血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣,；手工操作中，加樣板過多造成加樣後放入孵箱前等待時間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時),；加完標(biāo)本再加酶試劑時酶濺出孔外,。