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圓二色光譜儀在測(cè)試時(shí)有哪些注意事項(xiàng)
閱讀：2432發(fā)布時(shí)間：2022-8-5
圓二色光譜(簡(jiǎn)稱(chēng)CD)是應(yīng)用廣泛的測(cè)定蛋白質(zhì)二級(jí)結(jié)構(gòu)的方法,，是研究稀溶液中蛋白質(zhì)構(gòu)象的一種快速,、簡(jiǎn)單,、較準(zhǔn)確的方法,。它可以在溶液狀態(tài)下測(cè)定,，較接近其生理狀態(tài)。而且測(cè)定方法快速簡(jiǎn)便,，對(duì)構(gòu)象變化靈敏,，所以它是目前研究蛋白質(zhì)二級(jí)結(jié)構(gòu)的主要手段之一，并已廣泛應(yīng)用于蛋白質(zhì)的構(gòu)象研究中,。
圓二色光譜儀的測(cè)試注意事項(xiàng)
(1) 在標(biāo)準(zhǔn)操作時(shí),，譜帶寬度選為1 nm。對(duì)于高分辨率測(cè)量,，要用較窄的狹縫寬度,，此時(shí)光電倍增管的電壓較高，譜的信噪比差,。雖然對(duì)于正常測(cè)量最佳譜帶寬度是1~2 nm，但是在下列情況下要犧牲分辨率而需要較寬的狹縫寬度,。當(dāng)樣品的吸光度很高但CD信號(hào)很弱時(shí),，一方面要盡量保證測(cè)定CD峰所需要的足夠濃度，另一方面要設(shè)置較寬的狹縫,。不過(guò)此時(shí)要特別小心,，因?yàn)闃悠吩谖舛冗^(guò)高(A>2)的情況下可能存在熒光或雜散光引起的某些假象。另外,，在固體CD光譜測(cè)試時(shí)也需要較大的狹縫寬度(一般要求 > 2 nm),。
(2)橢圓率和摩爾橢圓率都依賴(lài)于測(cè)量條件。因此,，溫度,、波長(zhǎng)和樣品濃度總是應(yīng)該特別注明的。
(3) 當(dāng)用壓片法或石蠟油研磨法進(jìn)行固體粉末樣品測(cè)試時(shí),，要盡可能地研磨獲得細(xì)小均勻的樣品顆粒,。采用石蠟油糊方法時(shí)，必須注意某些憎水有機(jī)化合物可能溶于石蠟油中,，這時(shí)所得CD光譜在某種意義上應(yīng)視為溶液CD光譜,。采用壓片法測(cè)試固體CD時(shí)，在保證手性樣品的定性濃度達(dá)到CD光譜儀檢測(cè)要求的同時(shí),，片越薄越透明越好(但切忌破損),。在某些情況下，壓片法不適用于手性抗衡陰離子存在下的固體誘導(dǎo)CD光譜的測(cè)定,。
圓二色光譜儀使用時(shí)發(fā)生故障怎么做
1,、儀器發(fā)生故障時(shí)應(yīng)及時(shí)報(bào)告技術(shù)人員處理.儀器發(fā)生異?，F(xiàn)象時(shí)，馬上關(guān)閉電源,，保護(hù)現(xiàn)場(chǎng)并及時(shí)上報(bào),。
2、不亂按鍵盤(pán),，操作人員不得進(jìn)入操作規(guī)程規(guī)定以外的任何程序,，不得按規(guī)定以外的任何功能鍵.卸下火花臺(tái)板時(shí)要輕拿輕放，防止內(nèi)表面劃傷.取出火花室內(nèi)圓石英墊片和玻璃套管時(shí)務(wù)必謹(jǐn)慎小心,，防止操作不當(dāng)致其破碎,。
3、壓樣品夾子要垂直,，不得在未夾好樣品時(shí)按激發(fā)鍵,，不得在激發(fā)時(shí)觸摸或抬起樣品夾.如果遇到激發(fā)時(shí)聲音很大，應(yīng)該按F3鍵停止,，不允許直接抬起樣品夾,，否則易造成電路板燒毀。
4,、激發(fā)樣品后在火花臺(tái)內(nèi)產(chǎn)生黑色沉積物可導(dǎo)致電極與火花臺(tái)之間短路,，所以火花臺(tái)應(yīng)定期清理。
5,、非崗位人員不得隨便進(jìn)入機(jī)房,，機(jī)房?jī)?nèi)禁止吸煙，吃食物,。
6,、如果遇到突然斷電時(shí)，應(yīng)先關(guān)總,，再將其它電源關(guān)閉,，等到來(lái)電后，按規(guī)程條款進(jìn)行開(kāi)機(jī)操作,。
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