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AlphaLISA表觀遺傳學試劑選購
AlphaLISA表觀遺傳學試劑是由Alpha技術所延伸出來的便利產品,，可適用于偵測Peptide或Full-length型式的Histone蛋白,。具有高度專一性,，可藉由偵測各種后轉譯修飾類型的Histone蛋白,，定量組蛋白密碼(histone code)調控者(例如Acetyltransferase, Methyltransferase, Deacetylase, Demethylase)的酵素活性,。與ELISA產品相比,，AlphaLISA偵測試劑具有更加寬廣的偵測區(qū)間，可減少樣品稀釋比例的測試步驟,；并且具有更精簡快速的實驗流程,，讓研究者能夠更快取得定量結果。
AlphaLISA表觀遺傳學試劑作用原理：
AlphaLISA 偵測技術是由兩種核心物質所組成,，一為Donor bead,，另一為Acceptor bead。Donor bead 本身身帶有光敏感物質"Phthalocyanine",，因此當以680 nm 雷射光激發(fā)Donor bead 時,，此光敏感物質可催化周遭的氧分子形成活化態(tài),，并于作用范圍內激發(fā)鄰近的Acceptor bead 產生化學冷光反應,，此冷光能量會進一步轉移至Acceptor bead 本身所帶有的螢光物質,，使其終產生615 nm 螢光訊號。與其他偵測平臺相比(例如FRET,、TR-FRET),，AlphaLISA 技術的能量轉移有效距離長達200 nm，因此不論是勝肽,、重組蛋白,、或是細胞內原始含有的蛋白質，皆可作為實驗偵測對象,。具有專一性佳,、靈敏度高、偵測區(qū)間廣泛以及流程簡單等多項優(yōu)質特點,。
在進行實驗時,，研究者僅需自行準備(1). 待測酵素與輔因子(cofactor)、(2). 鍵結有Biotin 的Histone peptide substrate (或Histone 全長蛋白),，即可開始進行實驗,。此兩項所需試劑在產品應用文件中皆有詳盡的建議資訊，因此研究者可安心參照選購,。
AlphaLISA anti-histone H3 K9me2 antibody Acceptor beads的專一性測試結果證實此試劑的確能夠專一性地辨識偵測H3K9me2 biotinylated peptide,，并且無論是H3K9me1 peptides、H3K9me3 peptides,、methylated H3K4 peptides,、unmodified H3 peptides，皆無法干擾反應產生偽陽性結果,。
所有Alpha系列的Histone modification偵測試劑,，皆實際使用特定酵素進行完整測試，具有詳盡的測試條件與實驗流程可供參照,。使用G9a Histone H3-Lysine N-methyltransferase所進行的酵素用量和時間反應測試結果,，受測產品為Anti-methyl-Histone H3 Lysine 9 (H3K9me2) AlphaLISA® Acceptor Beads (需同時搭配Alpha Streptavidin Donor beads等產品使用)。其他測試項目包含：Cofactor titration (ex, SAM),、Enzyme inhibition,、Z'-factor determination.
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