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酶標(biāo)儀的檢測單位和計(jì)算方法

閱讀:1201      發(fā)布時(shí)間:2023-1-9
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  酶標(biāo)儀是對(duì)酶聯(lián)免疫檢測(EIA)實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行讀取和分析的專業(yè)儀器,。酶聯(lián)免疫反應(yīng)是通過偶聯(lián)在抗原或抗體上的酶催化顯色底物進(jìn)行的,,反應(yīng)結(jié)果以顏色顯示,通過顯色的深淺即吸光度值的大小就可以判斷標(biāo)本中待測抗體或抗原的濃度,。
  酶標(biāo)儀工作原理:使抗原或抗體結(jié)合到某種固相載體表面,,并保持其免疫活性。使抗原或抗體與某種酶連接成酶標(biāo)抗原或抗體,,這種酶標(biāo)抗原或抗體既保留其免疫活性,,又保留酶的活性。
  酶標(biāo)儀檢測單位:
  光通過被檢測物,,前后的能量差異即是被檢測物吸收掉的能量,,特定波長下,同一種被檢測物的濃度與被吸收的能量成定量關(guān)系。
  檢測單位用OD值表示,, OD是optical density(光密度)的縮寫,,表示被檢測物吸收掉的光密度, OD=log(1/trans),,其中trans為檢測物的透光值,。根據(jù)Bouger-amberT-beer法則,OD值與光強(qiáng)度成下述關(guān)系:
  E=OD=log(lo/Ι) 其中E表示被吸收的光密度,, Ιo 為在檢測物之前的光強(qiáng)度,,Ι為從被檢測物出來的光強(qiáng)度,。
  OD值由下述公式計(jì)算:
  c為檢測物的濃度 b為檢測物的厚度 a為摩爾因子
  在酶標(biāo)儀特定波長下測定每一種物質(zhì)都有其特定的波長,,在此波長下,此物質(zhì)能夠吸收多的光能量,。如果選擇其它的波長段,,就會(huì)造成檢測結(jié)果的不準(zhǔn)確。因此,,在測定檢測物時(shí),,我們選擇特定的波長進(jìn)行檢測,稱為測量波長,。

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