酶標(biāo)儀檢測單位:
酶標(biāo)儀光通過被檢測物,前后的能量差異即是被檢測物吸收掉的能量,,特定波長下,,同一種被檢測物的濃度與被吸收的能量成定量關(guān)系。
酶標(biāo)儀檢測單位用OD值表,,OD是opticaldelnsity(光密度)的縮寫,,表示被檢測物吸收掉的光密度,OD=10g(1/trans),,其中trans為檢測物的透光值,。根據(jù)Bouger-amberT-beer法則,,OD值與光強度下述系:
E=OD=logⅠ0/Ⅰ其中E表被吸收的光密度,Ⅰ0為在檢測物之前的光強度,,Ⅰ為從被檢測物出來的光強度,。
OD值由下述公式計算:
E=OD=C×D×E
其中:C為檢測物的濃度;D為檢測物的厚度,;E為摩爾子,。
在特定波長下測定每一種物質(zhì)都有其特定的波長,在此波長下,,此物質(zhì)能夠吸收最多的光能量,。如果選擇其它的波長段,就會造檢測結(jié)果的不準(zhǔn)確,。此,,在測定檢測物時,我們選擇特定的波長進行檢測,,稱為測量波長,。但是每一種物質(zhì)對光能量還存在一定的非特異性吸收,為了消除這種非特異性吸收,,我們再選取一個參照波長,,以消除這個不準(zhǔn)確性。在參照波長下,,檢測物光的吸收最小,。檢測波長和參照波長的吸光值之差可以消除非特異性吸收。
酶標(biāo)儀檢測值計算
酶標(biāo)儀中的檢測器接收透過被檢測物的光能量,,轉(zhuǎn)換成二進位數(shù)字信號,,最大為4095.酶標(biāo)儀定義沒有光源下的透光值為0%,沒有檢測物的透光值為100%,。則實際檢測中,,檢測物的透光值均在0%一100%之間。
酶標(biāo)儀透光值的計算如下:
T=(Meas-Min)/(Max-Min)
其中T為透光值,,Meas為檢測的二進位數(shù)值,,Min為在0%的情下檢測的二進位數(shù)值,Max為在100%的情況下檢測的二進位數(shù)值,,舉例如下:
酶標(biāo)儀的中心定位
酶標(biāo)儀會自動對酶標(biāo)儀酶標(biāo)孔進行中心定位,,中心定位是要消除酶標(biāo)儀酶標(biāo)孔底的凸凹引起的厚薄不均帶來檢測的不準(zhǔn)確。在對每一個酶標(biāo)儀進行檢測時,,儀器其實要進行35個點的測量,,選取最中間的5個點的均值為本孔的OD值。
酶標(biāo)儀光源的參照通道
參照通道是用來校準(zhǔn)由于電壓不穩(wěn)或燈泡磨損帶來的影響,。酶標(biāo)儀的用途和其它提示酶標(biāo)儀用于ELISA試劑的測定,,廣泛用于各種實驗室,,包括臨床實驗室。
酶標(biāo)儀質(zhì)量控制
酶標(biāo)儀質(zhì)量控制是試劑檢測的重要因素,。請按照試劑說明書的要求進行質(zhì)量控制,。酶標(biāo)儀空白校正有一些試劑盒的說陰書將空白孔設(shè)置為空氣,其它大多數(shù)空白孔的設(shè)置是用試劑來設(shè)置的,,請按照試劑盒的說明書要求進行,。酶標(biāo)儀檢測結(jié)果的解釋由于有相當(dāng)多的因素會影響檢測的結(jié)果,如不同的酶標(biāo)儀酶標(biāo)板,,檢測試劑的體積,,都會造成OD值的不,因此,,只有使用同一酶標(biāo)儀酶標(biāo)板反應(yīng)的試劑檢測結(jié)果才能比較和分析,。
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