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　　高通量型化學發(fā)光酶標儀作為一個常用的儀器,，其基本功能不外乎一個比色測定，與比色計所不同的是在測定波長范圍,、吸光度范圍,、光學系統(tǒng)、檢測速度,、震板功能,、溫度控制、定性和定量測定軟件功能等方面的差異,，當然全自動酶免疫分析系統(tǒng)還具有自動洗板,、溫育、加樣等功能,。我們在選購高通量型化學發(fā)光酶標儀時應該考慮儀器的濾光系統(tǒng)和測定波長參數：
　　一,、濾光系統(tǒng)
　　高通量型化學發(fā)光酶標儀簡單的是用濾光方式來劃分。一般來說,，可以分為濾光片型和光柵型兩大類,。也有一些高通量型化學發(fā)光酶標儀里面同時裝上了濾光片和光柵。但是濾片和光柵并不能同時完成同一個檢測,，本質上還只是把濾片和光柵放在了一起,，并沒有使兩者糅合而產生新的技術突破。
　　光柵型濾光系統(tǒng)具有使用方便,，可以進行光譜掃描,，靈活性等優(yōu)點。當然,，濾光片系統(tǒng)也有其顯著的優(yōu)勢,，例如價格較為便宜，檢測靈敏度高,，帶寬的可選擇性,，可以進行快速的濾光片切換，可配備有自動加樣系統(tǒng),，在化學發(fā)光檢測中光線的透過率高,。
　　目前，濾光片系統(tǒng)應用更廣,，因為它可以讓實驗者完成更多的試驗,。
　　二、測定波長
　　一般高通量型化學發(fā)光酶標儀的測定波長在400～750nm或800nm之間,，*可以滿足ELISA的顯色測定,。目前國內常見的ELISA試劑盒所使用的標記用酶均為辣根過氧化物酶(HRP)，底物通常為四甲基聯苯胺(TMB)和鄰苯二胺(OPD)，其在過氧化氫溶液的存在下,，經HRP作用,，分別氧化為2，2,，—二氨基偶氮苯(DAB)和聯苯醌,。當pH值為5．0左右時，DAB在450nm波長處有大吸收,，當pH值降為L0時,，大吸收波長移至492nm，同時摩爾消光系數變大,，顯色加深，因而常用強酸如硫酸或鹽酸終止反應,。TMB的氧化產物聯苯醌在波長450nm處有大消光系數,，如果HRP量少，H：O：和TMB過量時,，則形成藍色的陽離子根,。降低pH，即可使藍色的陽離子根轉變?yōu)辄S色的聯苯醌,，使用硫酸作為終止劑可使產物穩(wěn)定90min,。因此，450nm和492nm兩個波長是目前ELISA測定常用的,。各種高通量型化學發(fā)光酶標儀都配有放置濾光片的可自動轉換的部件,，可以同時安裝6～8片濾光片，所配備的濾光片均應包括上述兩個波長,，有的高通量型化學發(fā)光酶標儀以490nm濾光片替代492nm濾光片,，影響不大。除了這兩個基本濾光片外,，考慮到雙波長比色的需要,，還應有620nm或630nm或650nm和405nm波長的濾光片，其他濾光片可根據自己的需要選擇,。有時,，有的實驗室希望用高通量型化學發(fā)光酶標儀作微量生化測定，故高通量型化學發(fā)光酶標儀生產廠家對其生產的高通量型化學發(fā)光酶標儀擴展了紫外檢測功能,，此時需要一個340nm波長濾光片,。此時，高通量型化學發(fā)光酶標儀的測定波長范圍就成為340—750nm或800nm,。
　　高通量型化學發(fā)光酶標儀有單波長和雙波長檢測功能,。有時使用者不知在什么情況下使用單或雙波長檢測。所謂的“單波長”就是使用一種對顯色具大吸收的波長即450nm或492nm進行比色測定；而“雙波長”則除了用對顯色具大吸收的波長即450nm或492nm進行比色測定外,，同時用對特異顯色不敏感的波長如630nm進行測定,，高通量型化學發(fā)光酶標儀后打印出來的吸光度則為二者之差。630nm波長下得到的吸光度是非特異的,，來自于板孔上諸如指紋,、灰塵、臟物等所致的吸收,。因此,，在ELISA比色測定中，好使用雙波長,，且不必設空白孔,。