熒光酶標(biāo)儀原理
由光源氙弧燈發(fā)出的光通過切光器使其變成斷續(xù)之光以及激發(fā)光單色器變成單色光后,,此光即為熒光物質(zhì)的激發(fā)光,,被測的熒光物質(zhì)在激發(fā)光照射下所發(fā)出的熒光,經(jīng)過單色器變成單色熒光后照射于測樣品用的光電倍增管上,,由其所發(fā)生的光電流經(jīng)過放大器放大輸至記錄儀,,激發(fā)光單色器和熒光單色器的光柵均由電動(dòng)機(jī)帶動(dòng)的凸輪所控制,當(dāng)測繪熒光發(fā)射光譜時(shí),,將激發(fā)光單色器的光柵,,固定在*適當(dāng)?shù)募ぐl(fā)光波長處,而讓熒光單色器凸輪轉(zhuǎn)動(dòng),,將各波長的熒光強(qiáng)度訊號輸出至記錄儀上,,所記錄的光譜即發(fā)射光譜。
當(dāng)測繪熒光激發(fā)光譜時(shí),,將熒光單色器的光柵固定在*適當(dāng)?shù)臒晒獠ㄩL處,,只讓激發(fā)光單色口的凸輪轉(zhuǎn)動(dòng),,將各波長的激發(fā)光的強(qiáng)度訊號輸出至記錄儀,所記錄的光譜即激發(fā),。
當(dāng)進(jìn)行樣品溶液的定量分析時(shí),,將激發(fā)光單色器固定在所選擇的激發(fā)光波長處,將熒光單色器調(diào)節(jié)至所選擇的熒光波長處,,由記錄儀得出的信號是樣品溶液的熒光強(qiáng)度,。
光吸收酶標(biāo)儀原理
光是電磁波,波長100nm~400nm稱為紫外光,, 400nm~780nm之間的光可被人眼觀察到,,大于780nm稱為紅外光。光吸收酶標(biāo)儀測定的原理是在特定波長下,,檢測被測物吸光值,。
光通過被檢測物,前后的能量差異即是被檢測物吸收掉的能量,,特定波長下,,同一種被檢測物的濃度與被吸收的能量成定量關(guān)系。
在特定波長下測定每一種物質(zhì)都有其特定的波長,,在此波長下,此物質(zhì)能夠吸收*多的光能量,。如果選擇其它的波長段,,就會造成檢測結(jié)果的不準(zhǔn)確。因此,,在測定檢測物時(shí),,我們選擇特定的波長進(jìn)行檢測,稱為測量波長,。
但是每一種物質(zhì)對光能量還存在一定的非特異性吸收,,為了消除這種非特異性吸收,我們再選取一個(gè)參照波長,,以消除這個(gè)不準(zhǔn)確性,。在參照波長下,檢測物光的吸收*小,。酶標(biāo)儀檢測波長和參照波長的吸光值之差可以消除非特異性吸收,。
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