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2016-12-10 閱讀(2814)
ELISA試劑盒技術(shù)在60年代提出，因?yàn)榫哂徐`敏度高,、特異性強(qiáng),，酶免疫試劑的性質(zhì)比較穩(wěn)定，操作方法簡(jiǎn)便快速,、無放射性污染以及應(yīng)用范圍廣等很多優(yōu)點(diǎn),，ELISA試劑盒迅速在醫(yī)學(xué)基礎(chǔ)理論研究，臨床病毒學(xué)和生物化學(xué)檢驗(yàn)等工作中獲得了廣泛的應(yīng)用,。這篇文章中Lequin博士追述了EIA和ELISA技術(shù)的發(fā)展歷程,。
當(dāng)初我們?cè)贠ranon開展這個(gè)項(xiàng)目的初衷只是由于當(dāng)時(shí)Oranon管理部門熱衷于 多年前 免疫化學(xué)診斷妊娠的成功（以血清抑制凝集試驗(yàn)和乳膠凝集試驗(yàn) 為基礎(chǔ)）。但是由于工程太大 ,，需耗時(shí)較多而阻止了該項(xiàng)技術(shù)的的深入發(fā)展,。Schuurs提出將酶附著于抗原或者抗體，通過化學(xué)反應(yīng)的測(cè)定終產(chǎn)物顏色這一設(shè)想時(shí)，大家都表示了贊同,。因?yàn)橐?一種 簡(jiǎn)易的可以根據(jù)顏色變化而即插即讀的試紙條作為基礎(chǔ),，似乎可以取得進(jìn)一步的成功。我們采用了分析妊娠HCG來作為我們研究的模型,。盡管如此,，Schuurs對(duì)于這項(xiàng)技術(shù)將來的應(yīng)用仍然非常清楚。正象他在試驗(yàn)建議的zui后一句話所說的那樣：我認(rèn)為,，探索這項(xiàng)技術(shù)所取得的任何成功,，都將開辟免疫學(xué)診斷的新領(lǐng)域。
早期的研究過程中我們至少在試驗(yàn)原理上還是取得了一定的進(jìn)展,，但是盡管我們盡zui大努力去發(fā)展以ELISA試劑盒技術(shù)為基礎(chǔ)的根據(jù)顏色變化而診斷妊娠的即插即讀的技術(shù)時(shí),，還是失敗了。將許多必需的試劑壓縮到一個(gè)試紙條上,，并且在模板上使反應(yīng)過程標(biāo)準(zhǔn)化,，在那個(gè)時(shí)間看起來還需要解決很多技術(shù)問題。實(shí)際上,，在Oranon研究組發(fā)現(xiàn)了溶膠顆粒免疫測(cè)定（SPIA）技術(shù)發(fā)明后,，依靠顏色變化診斷妊娠的問題也就變得可行了?？偨Y(jié)以前的研究經(jīng)驗(yàn),，我們改變了原來的研究方向。如內(nèi)分泌領(lǐng)域（我們的目的是直接想同RIA競(jìng)爭(zhēng)）,，感染病領(lǐng)域,。zui初是檢測(cè)乙型肝炎檢測(cè)，該領(lǐng)域在前些年澳抗被作為乙型肝炎病毒感染的標(biāo)志物被發(fā)現(xiàn)后就進(jìn)行了一些探索,。
同時(shí)，我們也借鑒學(xué)習(xí)了Engvall和Perlmann以及隨后的學(xué)者開展的關(guān)于ELISA和EIA的研究,，而我們主要的研究領(lǐng)域是細(xì)菌,、寄生蟲和病毒，尤其是London的Voller,、Bidwell以及荷蘭國家公共衛(wèi)生研究所的Ruitenberg所做的工作,。當(dāng)時(shí)領(lǐng)域內(nèi)所使用的方法如免疫熒光，血清凝集實(shí)驗(yàn),，補(bǔ)體結(jié)合實(shí)驗(yàn)比較的笨拙,，相比較而言ELISA和EIA法的簡(jiǎn)易性決定了它將來在廣泛的微生物感染診斷中能夠獲得快速的發(fā)展。能夠迅速為大家所接受,，促進(jìn)了眾多的生物醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室和第三世界的國家建立了一種可靠的感染性疾病診斷方法,。
當(dāng)時(shí)，這種方法只被局限地應(yīng)用于少數(shù)高度專業(yè)的實(shí)驗(yàn)室,。Voller和Bidwell首先應(yīng)用了96孔微板用于EIA/ELISA實(shí)驗(yàn),，也就是現(xiàn)在廣泛應(yīng)用的ELISA試劑盒的雛形,，由此也引發(fā)了*次免疫分析自動(dòng)化的浪潮。我們?cè)贠ranon也使用了這種方法檢測(cè)乙型肝炎和其他獻(xiàn)血篩查項(xiàng)目,。
RIA法及早進(jìn)入內(nèi)分泌學(xué)和腫瘤學(xué)方面的應(yīng)用領(lǐng)域并且趨于成熟,，它的性和靈敏度也超過了興起不久的EIA和ELISA技術(shù)，而且很多實(shí)驗(yàn)室都已經(jīng)配備了放射性核素的相關(guān)設(shè)備,，并且習(xí)慣了與之開展工作,，他們還不能意識(shí)到非同位素檢測(cè)的優(yōu)勢(shì)。是自動(dòng)化改變了這些,，RIA的自動(dòng)化牽涉到放射性同位素引起的容器和廢物處理問題,，而EIA和ELISA卻使全自動(dòng)隨機(jī)存取的免疫分析系統(tǒng)成為可能，該系統(tǒng)正是80年代診斷儀器制造商努力開拓的方向,。這就導(dǎo)致了許多低成本的,、設(shè)備簡(jiǎn)單，可靠性強(qiáng)的免疫化學(xué)診斷方法從專業(yè)的放射性實(shí)驗(yàn)室進(jìn)入了普通化學(xué)實(shí)驗(yàn)室,。EIA和ELISA也因此找到了他在診斷感染性疾病以外的應(yīng)用領(lǐng)域,。
Oranon管理部門處理所采用的策略，也是EIA和ELISA試劑盒技術(shù)取得成功的決定性因素,。70年代中期,，眾多公司匯集于Oranon，都希望得到當(dāng)局的許可,。管理層在經(jīng)過長(zhǎng)時(shí)間的討論后,，決定不壟斷該技術(shù)，而是將該技術(shù)轉(zhuǎn)讓給任何達(dá)到了許可條件的公司,，因?yàn)樵摷夹g(shù)在實(shí)驗(yàn)室診斷醫(yī)學(xué)中已經(jīng)廣泛應(yīng)用,，并且不斷擴(kuò)展，后來總共一百多張?jiān)S可證的數(shù)據(jù)來說明當(dāng)時(shí)的情況是十分貼切的,。我相信這項(xiàng)措施對(duì)實(shí)驗(yàn)室診斷醫(yī)學(xué)是有所幫助的,，有時(shí)候也會(huì)設(shè)想，當(dāng)其他公司為zui近一項(xiàng)重要的技術(shù)而采用了一種相同的許可政策時(shí),，在將來會(huì)獲得怎樣的進(jìn)展,，產(chǎn)生怎樣的影響。
