一,、概要
維生素B12作為痕量元素,生物上屬于重要的螯合物膜劑,,由含鈷的卟啉環(huán)作為中心原子組成,,鈷是由4個氮原子、一個氫和一個二甲基苯并咪唑組成,。維生素B12,,為穩(wěn)定的復合物,在胃酸里一種所謂的內(nèi)源因子幫助下,,被小腸下部分吸收,。維生素B12缺乏會導致惡性貧血,這種疾病不是由于維生素B12供給不足,,而是因為缺乏內(nèi)源因子,。惡性貧血者可服用高劑量的維生素B12。
現(xiàn)有的檢測程序主要是微生物方法(1),,但也有高效液相色譜法和薄層色譜法,,這些需要高量的時間和儀器。
本檢測試劑盒定量檢測維生素食品(2)中的維生素B12,,要比傳統(tǒng)的微生物分析法(24-48小時)更快,,包含樣品預處理只需2.5-4個小時。
二,、檢測原理
維生素B12定量測試基于酶聯(lián)免疫吸收分析原理,。針對維生素B12的抗體約束在酶標板上。樣品維生素B12和維生素B12過氧化物酶結合物加到酶標板孔中,。標記的酶和游離維生素B12競爭抗體結合位點,。在室溫下培育一小時后,用稀釋的洗滌液洗孔,,去掉未結合物,。加入培養(yǎng)基溶液,,培育20分鐘,變成藍色,。加入停止液抑制顏色發(fā)展,顏色變成了黃色,,ELISA讀數(shù)器測量黃色,,維生素B12濃度間接的和測試樣品顏色強度成比例。