一、概要
維生素B12作為痕量元素,,生物上屬于重要的螯合物膜劑,,由含鈷的卟啉環(huán)作為中心原子組成,,鈷是由4個氮原子、一個氫和一個二并咪唑組成,。維生素B12,,為穩(wěn)定的復(fù)合物,在胃酸里一種所謂的內(nèi)源因子幫助下,,被小腸下部分吸收,。維生素B12缺乏會導(dǎo)致惡性貧血,,這種疾病不是由于維生素B12供給不足,而是因為缺乏內(nèi)源因子,。惡性貧血者可服用高劑量的維生素B12,。
現(xiàn)有的檢測程序主要是微生物方法(1),但也有高效液相色譜法和薄層色譜法,,這些需要高量的時間和儀器,。
本檢測試劑盒定量檢測維生素食品(2)中的維生素B12,要比傳統(tǒng)的微生物分析法(24-48小時)更快,,包含樣品預(yù)處理只需2.5-4個小時,。
二、檢測原理
維生素B12定量測試基于酶聯(lián)免疫吸收分析原理,。針對維生素B12的抗體約束在酶標(biāo)板上,。樣品維生素B12和維生素B12過氧化物酶結(jié)合物加到酶標(biāo)板孔中。標(biāo)記的酶和游離維生素B12競爭抗體結(jié)合位點,。在室溫下培育一小時后,,用稀釋的洗滌液洗孔,去掉未結(jié)合物,。加入培養(yǎng)基溶液,,培育20分鐘,變成藍(lán)色,。加入停止液抑制顏色發(fā)展,,顏色變成了黃色,ELISA讀數(shù)器測量黃色,,維生素B12濃度間接的和測試樣品顏色強度成比例,。