一,、產(chǎn)品概述

   脫氧雪腐鐮刀菌烯醇(deoxynivalenol，DON)又稱嘔吐毒素(vomitoxin),，主要是由鐮刀菌的某些種產(chǎn)生的化學(xué)結(jié)構(gòu)和生物活性相似的有毒代謝產(chǎn)物——單端孢霉烯族化合物中的一種,。DON 的主要產(chǎn)生菌是禾谷鐮刀菌(Fusariumgraminearum)，DON廣泛存在于,，主要污染小麥,、大麥、玉米等谷類作物,，也污染糧食制品,，人和動物在誤食被該毒素污染的糧谷類后可以產(chǎn)生廣泛的毒性效應(yīng)。近年來發(fā)現(xiàn)DON可能與人類食管癌,，對人類及動物的健康構(gòu)成威脅,。DON屬于劇毒或中等毒物,，人畜攝入了被DON污染的食物／飼料后，會導(dǎo)致厭食,、嘔吐,、腹瀉、發(fā)燒,、站立不穩(wěn)、反應(yīng)遲鈍等急性中毒癥狀,，嚴(yán)重時損害造血系統(tǒng)造成死亡,。研究表明,，DON可能對免疫系統(tǒng)有影響，有明顯胚胎毒性和一定致畸作用,，可能有遺傳毒性,，但無致癌,、致突變作用。由于DON的危害嚴(yán)重,，引起了各國的普遍重視,。谷物及飼料中DON的含量有嚴(yán)格的*。我國谷物中DON 的*為1．0 mg／kg ,。因此,，有必要對其進(jìn)行有效的監(jiān)控。HPLC或GC-MS用作檢測嘔吐毒素的方法,，但是其前處理步驟繁瑣,，費用昂貴,。酶聯(lián)免疫檢測試劑盒則可經(jīng)濟(jì),、快速地檢測嘔吐毒素,。

二,、適用范圍

嘔吐毒素ELISA檢測試劑盒可定性,、定量測定大米,、小米、面等谷物和飼料中的嘔吐毒素,。

三,、試驗原理

嘔吐毒素ELISA檢測試劑盒采用競爭ELISA，在微孔板上預(yù)包被嘔吐毒素抗原,，加入樣本/嘔吐毒素標(biāo)準(zhǔn)品溶液及辣根過氧化物酶標(biāo)記的嘔吐毒素抗體,。樣本或標(biāo)準(zhǔn)品溶液中的嘔吐毒素與預(yù)包被在板孔上的嘔吐毒素抗原競爭結(jié)合辣根過氧化物酶標(biāo)記的嘔吐毒素抗體，與樣本或標(biāo)準(zhǔn)品溶液中的嘔吐毒素結(jié)合的酶標(biāo)抗體在洗滌時被除去,。再加入TMB顯色,，讀取吸光值,。樣本的吸光值與其所含殘留物嘔吐毒素抗原的含量成負(fù)相關(guān)。對照標(biāo)準(zhǔn)曲線,，即可得出相應(yīng)殘留物嘔吐毒素的含量,。

四、注意事項

 1. 室溫低于20℃或試劑及樣本沒有回到室溫（20～25℃）會導(dǎo)致所有標(biāo)準(zhǔn)的OD值偏低,。

 2. 在洗板過程中如果出現(xiàn)板孔干燥的情況,，則會出現(xiàn)標(biāo)準(zhǔn)曲線不成線性，重復(fù)性不好的現(xiàn)象,。所以洗板拍干后應(yīng)立即進(jìn)行下一步操作,。

 3. 每加一種試劑前需將其搖勻。

 4. 反應(yīng)終止液為2M鹽酸,，避免接觸皮膚,。

 5. 不要使用過了有效日期的試劑盒；也不要使用過了有效期的試劑盒中的任何試劑,，摻雜使用過了有效期的試劑盒會引起靈敏度的降低；不要交換使用不同批號試劑盒中的試劑,。

 6. 儲存條件：

 7. 保存試劑盒于2～8℃,，不要冷凍，將不用的酶標(biāo)板微孔板放進(jìn)自封袋重新密封,。標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)和無色的發(fā)色劑對光敏感,，因此要避免直接暴露在光線下。

 8. 試劑變質(zhì)的跡象：

 9. 發(fā)色試劑有任何顏色表明發(fā)色劑變質(zhì),，應(yīng)當(dāng)棄之。0標(biāo)準(zhǔn)的吸光度（450/630nm）值小于0.5（A450nm<0.5）時,，表示試劑可能變質(zhì),。

 10. 在加入顯色液后,，一般顯色時間為20～30min即可。若顏色較淺,，可延長反應(yīng)時間到35min（或更長）,，但不得超過40min,。反之,，則減短反應(yīng)時間。

嘔吐毒素ELISA檢測試劑盒*反應(yīng)溫度為25℃,，溫度過高或過低將導(dǎo)致檢測吸光度值和靈敏度發(fā)生變化,。

貯藏條件：保存試劑盒于2～8℃。