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實(shí)驗(yàn)室離心機(jī)的離心時(shí)間對分離效果的影響
對于離心機(jī)的分離效果,我們常常會考慮離心機(jī)種類,,離心方法,,離心介質(zhì)等因素,但是在實(shí)際操作中,,除了以上幾點(diǎn),,離心機(jī)轉(zhuǎn)速和離心時(shí)間以及離心介質(zhì)的PH值和溫度等條件也是很重要的,下面就為大家詳細(xì)介紹一下后面三種因素對于分離效果的影響,。
1,、離心時(shí)間
實(shí)驗(yàn)室離心機(jī)的離心時(shí)間是影響離心效果十分重要的一個(gè)因素,離心方法的不同所需要的離心時(shí)間也會不同。下面以差速離心和等密度梯度離心以及密度梯度離心為例,,詳細(xì)介紹,。對于差速離心來說,離心時(shí)間指的是某種顆粒*沉降到離心管底的時(shí)間,;而對于等密度梯度離心來說,,離心時(shí)間則是指顆粒*到達(dá)等密度點(diǎn)的平衡時(shí)間;zui后一個(gè)密度梯度離心的離心時(shí)間指的是形成界限分明的區(qū)帶的時(shí)間,。對于后面兩種離心方法,,其所需的區(qū)帶形成時(shí)間或平衡時(shí)間,影響因素很復(fù)雜,,可通過試驗(yàn)后確定,。
2、離心轉(zhuǎn)速
離心機(jī)的轉(zhuǎn)速的大小主要由轉(zhuǎn)子的轉(zhuǎn)速和顆粒的旋轉(zhuǎn)半徑來決定,,在說明離心條件時(shí),,往往也用相對離心力場來表示。實(shí)際工作中,,離心力場的數(shù)據(jù)是指其平均值,。即是指在離心溶液中點(diǎn)處顆粒所受的離心力場。
3,、離心介質(zhì)的PH值和溫度
離心介質(zhì)的PH值的設(shè)定一般是處于酶穩(wěn)定的PH范圍內(nèi),可采用緩沖液,,在試驗(yàn)過稱重,,要避免過酸或者過堿的環(huán)境對離心機(jī)本身產(chǎn)生腐蝕作用。
在實(shí)驗(yàn)室離心機(jī)工作時(shí),,除了要格外注意對離心介質(zhì)的選擇之外,,還要控制好溫度及介質(zhì)溶液的PH值等離心條件,防止其分離物質(zhì)的凝集,、變性和失活,。一般來說,我們將離心溫度會控制在4℃左右,,對于某些熱穩(wěn)定性較好的酶等,,離心也可在室溫下進(jìn)行。
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