離子色譜儀的原理是通過輸液泵將流動相以穩(wěn)定的流速(或壓力)輸送到分析系統(tǒng),。在色譜柱之前,,樣品將被引入樣品注射器。流動相將樣品帶入色譜柱,,分離柱中的成分,,然后與流動相一起依次流向檢測器。在抑制性離子色譜中,,在電導檢測器前增加一個抑制系統(tǒng),,即使用另一個高壓注射泵將再生液輸送到抑制器。在抑制器中,,降低流動相的背景電導率,,然后將流出物引入電導率檢測單元,并將檢測到的信號發(fā)送到數(shù)據(jù)系統(tǒng)進行記錄,、處理或保存,。
離子色譜是一種高效液相色譜,也稱為高效離子色譜或現(xiàn)代離子色譜,。與傳統(tǒng)的離子交換柱色譜不同,,該樹脂交聯(lián)度高、交換容量低,、進樣量小,。當用柱塞泵輸送洗脫液時,通常要對洗脫液進行在線自動連續(xù)電導率檢測,。
從水中常見糖類的pKa值可以看出,,常見的單糖、二糖和糖醇的pKa值一般在L2-14之間,,常見的糖醛酸和糖胺的pKa值小于7,。當堿性溶液的酸堿度大于或等于L2時,大多數(shù)糖基化以陰離子的形式存在,,因此陰離子交換色譜柱可作為洗脫液分離強堿性溶液,。
由于糖分子結(jié)構(gòu)的疏水部分,,糖的分離機理不僅是陰離子交換,還有疏水吸附,。碳水化合物在陰離子交換柱上的保留容量主要取決于其電荷數(shù),、分子大小、組成和結(jié)構(gòu),。
安培檢測是一種檢測技術(shù),,它測量電化學活性物質(zhì)在適當?shù)耐饧与娢幌掳l(fā)生氧化或還原反應時電流的變化。糖的分離是在堿性條件下進行的,,而金電極的檢測條件通常是堿性的,。金電極表面可以為糖的電化學氧化提供反應環(huán)境。因此,,金電極檢測與陰離子交換分離有很好的匹配,。由于糖的氧化產(chǎn)物會覆蓋電極表面,造成不可逆的污染,,因此需要選擇不同的外加電位對電極表面進行清洗和活化,,使電極能夠連續(xù)工作,即脈沖安培檢測,。