1.原理

該方法用于特異性檢測纖維素酶制劑中的葡聚糖酶（內(nèi)切纖維素酶）,。孵育染色的纖維素和纖維素酶，底物通過內(nèi)部作用被解聚產(chǎn)生低分子量的染色片段,，之后在反應混合物中加入沉降劑,，通過離心方法去除大分子量物質(zhì)，測定上清液的顏色,，參照標準曲線可以確定分析溶液中的內(nèi)切纖維素酶,。

2．底物

底物采用的是部分解聚的染色的羧甲基纖維素-4M，用藍色染料R染色多聚糖,，大約1個染料分子連接20個糖基,。

3．溶解

將2g粉狀底物加入到帶加熱板和磁力攪拌棒攪拌的80mL劇烈沸騰的水中，之后關閉加熱板,，繼續(xù)攪拌直到溶液/漿液勻質(zhì)（大約20分鐘）,，再加入5mL乙酸鈉緩沖液（2M，pH4.5）,，冷卻溶液到室溫,。調(diào)節(jié)pH為4.5,，定容到100mL。該溶液可以儲存在4℃下,，在此條件下,，并且不被內(nèi)切纖維素酶污染時，該溶液可以穩(wěn)定保存至少12個月,。下次使用前,，劇烈震蕩儲存瓶子將底物溶液混合。該溶液是粘性的,，應用容積式移液器移?。ㄈ?span>Eppendorf Multipette® with a 5.0 mL Combitip）。