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經(jīng)營范圍：國家標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì),、進(jìn)口標(biāo)準(zhǔn)品,、冶金標(biāo)樣、標(biāo)準(zhǔn)氣體,、藥典對(duì)照品,、標(biāo)準(zhǔn)菌種、實(shí)驗(yàn)室耗材,、試劑盒

產(chǎn)品信息：EHS細(xì)胞-臨床醫(yī)學(xué)

標(biāo)準(zhǔn)名稱：EHS細(xì)胞-臨床醫(yī)學(xué)

產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

<1>細(xì)胞培養(yǎng)

• 細(xì)胞請(qǐng)于細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng),，大部分細(xì)胞是37℃，5% CO2,，濕度100%環(huán)境下培養(yǎng)的,。有極少部分細(xì)胞培養(yǎng)條件不*，請(qǐng)仔細(xì)閱讀相應(yīng)的細(xì)胞說明書,，使用正確的培養(yǎng)基及培養(yǎng)條件,；
• 細(xì)胞于培養(yǎng)瓶或皿中培養(yǎng)，加入適量說明書上標(biāo)注的細(xì)胞相應(yīng)*培養(yǎng)基（一般液面高度2-3mm即可）,。

<2>細(xì)胞傳代（以下步驟適用于10cm皿）

• 細(xì)胞培養(yǎng)至密度達(dá)80%以上時(shí)即可傳代,，先將細(xì)胞培養(yǎng)基取出3mL用15mL離心管裝好，其他培養(yǎng)基全部吸干舍棄,；
• 培養(yǎng)皿加入2-3mL無菌PBS,，輕輕晃動(dòng)皿，使PBS浸洗到皿底所有部位,，PBS吸干舍棄,；
• 加入1mL胰酶，輕輕晃動(dòng)皿,，使胰酶浸沒到皿底所有部位,，將皿蓋好放入培養(yǎng)箱中消化；

3min后,，顯微鏡下觀察細(xì)胞,，若大部分細(xì)胞不再貼壁,，即可加入*步收集的培養(yǎng)基混勻；

• 若細(xì)胞還是貼壁,，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至不貼壁為止,；
• 將細(xì)胞懸液均勻分成幾份，分別加入不同培養(yǎng)皿中,，補(bǔ)加新培養(yǎng)基后放回培養(yǎng)箱培養(yǎng),。

<3>相關(guān)問題

• 部分細(xì)胞在傳代后時(shí)，會(huì)有以下現(xiàn)象：細(xì)胞內(nèi)會(huì)有黑色小點(diǎn),、細(xì)胞間隙有些顆粒物,、培養(yǎng)基漂浮一些死細(xì)胞或者細(xì)胞長(zhǎng)的極慢。出現(xiàn)以上現(xiàn)象時(shí),，可以咨詢本公司技術(shù)人員此現(xiàn)象是否正常及相關(guān)處理方式,，不要頻繁換液，大多數(shù)細(xì)胞1周換液2-3次即可,。
• 細(xì)胞碎片較多,、背景較臟時(shí)，貼壁細(xì)胞用PBS漂洗兩次,、懸浮細(xì)胞打散后低速離心（900rpm,，3min）能有效改善。
• 傳代比例建議1:2-1:3,，長(zhǎng)得比較快的細(xì)胞可以1：3,，比較慢的按1:2傳代。傳代后,，建議不要使用傳代前培養(yǎng)所使用的培養(yǎng)基,，會(huì)有大量細(xì)胞碎片甚至導(dǎo)致細(xì)胞死亡的風(fēng)險(xiǎn)。
• 細(xì)胞狀態(tài)不好或者生長(zhǎng)極慢的時(shí)候,，可以通過增加血清濃度調(diào)整細(xì)胞狀態(tài)及生長(zhǎng)速度,。
• 請(qǐng)不要隨意更換培養(yǎng)基，因?qū)嶒?yàn)需要,，可以逐步馴化。

懸浮傳代：混勻細(xì)胞,，收集細(xì)胞懸液900-1000rpm離心3min,，棄上清。再加5ml PBS重懸細(xì)胞,，再離心后,，用*培養(yǎng)基重懸接種到新的培養(yǎng)皿。第二次PBS重懸是為了去除碎片,，如果平時(shí)碎片比較少,，傳代時(shí)可以省略PBS重懸的步驟,；如果碎片很多，建議PBS多洗一次,。

• 細(xì)胞凍存

<1>凍存操作

• 凍存液配方：建議使用92%FBS+8%DMSO,，客戶自身實(shí)驗(yàn)室所使用的凍存液也可以適用，血清濃度不低于30%,，DMSO含量不高于12%即可,。
• 收集細(xì)胞按照以上細(xì)胞傳代步驟操作至第④步后，將細(xì)胞懸液收集入15mL離心管,，離心（1200rpm,，3min）；
• 棄上清,，加入配制好的凍存液,，重懸細(xì)胞，懸液加入無菌凍存管中,；
• 將凍存管在4℃靜置10min,，后將之正置于室溫下的厚壁有蓋泡沫盒中，蓋緊盒蓋,，放入-80℃冰箱過夜,，第二天放入液氮即可長(zhǎng)期保存。

<2>相關(guān)問題

• 10cm皿的細(xì)胞長(zhǎng)滿一般可以凍存2-3管,，部分細(xì)胞長(zhǎng)的比較慢,，凍存的細(xì)胞密度要稍微大點(diǎn)，以防止復(fù)蘇后生長(zhǎng)困難,。
• 凍存液中含的DMSO請(qǐng)使用細(xì)胞級(jí)DMSO,，同時(shí)濃度不要太高。部分細(xì)胞在10%DMSO條件下凍存會(huì)死亡,，所以DMSO濃度5%-8%是比較推薦的濃度,。
• 細(xì)胞凍存及復(fù)蘇遵循慢凍快融的原則，即凍存時(shí)溫度不能急劇下降,，應(yīng)控制溫度緩慢下降,。復(fù)蘇時(shí)應(yīng)快速融化，融化后盡快加入培養(yǎng)基中,。
• 凍存時(shí)建議設(shè)置凍存檢測(cè),，即取0.2-0.3mL的凍存液重懸的細(xì)胞于一個(gè)凍存管中，與正常體積凍存的細(xì)胞共同凍存,，至液氮后復(fù)蘇檢查凍存結(jié)果,。凍檢合格前，留一部分細(xì)胞繼續(xù)培養(yǎng),，以防萬一,。

另外,，我們提供各種不同濃度的單標(biāo)及混標(biāo)定制服務(wù)，包含【十大系列】（真誠合作,，誠招代理）：

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· TOC/TIC標(biāo)準(zhǔn)液

· 原子吸收光譜儀標(biāo)準(zhǔn)液

· PH緩沖液（PH校正液@25℃）

· 比色計(jì)標(biāo)準(zhǔn)液（鉑鈷比色標(biāo)準(zhǔn)液）

· 離子層標(biāo)準(zhǔn)液（陰離子標(biāo)準(zhǔn)液,、陽離子標(biāo)準(zhǔn)液）

公司簡(jiǎn)介：

中國標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)網(wǎng)隸屬于北京普天同創(chuàng)生物科技有限公司，是國內(nèi)最早的專業(yè)化標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)信息平臺(tái),。創(chuàng)建以來,，一直專注于標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的推廣與銷售，是多家知名標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)研制單位和分析儀器公司的代理商,，代理銷售國內(nèi)外數(shù)萬種標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)和標(biāo)準(zhǔn)樣品,，同時(shí)經(jīng)營各類精細(xì)化工產(chǎn)品及計(jì)量設(shè)備，業(yè)務(wù)遍及國內(nèi)外眾多檢測(cè)機(jī)構(gòu),、科研院校和工廠企業(yè),，在業(yè)界具有較強(qiáng)的影響力。