_{血藥濃度檢測(cè)的三大技術(shù)方法}

血藥濃度系指藥物吸收后在血漿內(nèi)的總濃度,，包括與血漿蛋白結(jié)合的或在血漿游離的藥物,，有時(shí)也可泛指藥物在全血中的濃度,。藥物作用的強(qiáng)度與藥物在血漿中的濃度成正比,，藥物在體內(nèi)的濃度隨著時(shí)間而變化,。目前監(jiān)測(cè)方法主要是液相色譜法,。

一,、臨床的作用與意義

臨床實(shí)踐中常常發(fā)現(xiàn)這樣一種現(xiàn)象，同樣劑量的藥物,，用于患同種疾病的不同病人,，其療效往往相差很大，有的表現(xiàn)為yao到病除,，恰到好處,；有的療效一般，病況稍見(jiàn)好轉(zhuǎn),；而有的卻療效不好,。其毒副作用表現(xiàn)也不一樣，有的幾乎*或輕微,；有的卻嚴(yán)重中毒,。這是因?yàn)榇嬖谥鴤€(gè)體差異，如：年齡、性別,、機(jī)體狀況,、遺傳、種族等不同差異,。例如,，用苯妥英鈉治療驚厥和心律失常，其適治療劑量在不同的人身上變化很大,。用常用量治療時(shí),，其血藥濃度變動(dòng)較大，有的人低到只有2毫克/升,，根本無(wú)療效;有的人卻高達(dá)50毫克/升,，病人嚴(yán)重中毒。

為了做到合理用藥,，科學(xué)家們做了大量實(shí)驗(yàn),，發(fā)現(xiàn)這樣一個(gè)有意義的現(xiàn)象：不同的人，其有效的藥物劑量變動(dòng)很大,，但是其安全有效的血藥濃度變動(dòng)卻較小,。一般不過(guò)1倍左右。當(dāng)血藥濃度大于安全有效范圍,，其毒副作用和表現(xiàn)及其程度在不同病人身上變動(dòng)也較小。再舉苯妥英鈉的例子,，該藥的安全有效血濃度范圍在幾乎所有病人均為10～20毫克/升,。同樣當(dāng)苯妥英鈉的血濃度超過(guò)安全范圍，幾乎所有病人都出現(xiàn)中毒反應(yīng),。當(dāng)血藥濃度為20～30毫克/升時(shí),，病人則出現(xiàn)精神異常現(xiàn)象,。

對(duì)那些有效濃度與中毒血濃度比較接近的藥物（如洋地黃類）,，以及對(duì)那些長(zhǎng)期用藥或合并用藥的病人，為防止藥物在體內(nèi)濃度過(guò)高而產(chǎn)生毒副作用,，應(yīng)該經(jīng)常測(cè)定血藥濃度,。

如今，一些有條件的醫(yī)院對(duì)病人除掌握藥物的劑量和給藥的次數(shù)以外,，還常常測(cè)定血藥濃度,，以便指導(dǎo)臨床選擇適合不同個(gè)體的*治療方案和zui合適的治療劑量。

二,、監(jiān)測(cè)方法

目前血藥濃度監(jiān)測(cè)的方法雖然很多,，但常用的有光譜法、色譜法、免疫法三大類 ,。

1.光譜法

該類方法有比色法,、紫外-可見(jiàn)分光光度法、熒光法等,。這類方法靈敏度比較低,，只能監(jiān)測(cè)體液中藥物質(zhì)量濃度在1.0μg·L-1以上的藥物，并且代謝物或結(jié)構(gòu)相近化合物對(duì)監(jiān)測(cè)的干擾較大,。在所查文獻(xiàn)中,，采用雙波長(zhǎng)紫外分光光度法監(jiān)測(cè)血中氨茶堿濃度的小檢測(cè)限為0.5μg·mL-1，苯妥英鈉的低檢測(cè)限為5μg·mL-1,。盡管采用差示分光光度法,、導(dǎo)數(shù)分光光度法等來(lái)提高方法的專一性，減少了雜質(zhì)的干擾,，但并不能提高該類檢測(cè)方法的靈敏度,。另外，應(yīng)用這類方法所需樣品量大,，尤其象差示分光光度法所需樣品量更大,。以上缺點(diǎn)限制了該類方法在血藥濃度監(jiān)測(cè)中的應(yīng)用。尤其近年來(lái)色譜技術(shù)的發(fā)展,，使得光譜法因其靈敏度,、特異性等局限而使得其應(yīng)用逐漸減少。但對(duì)于藥物濃度較高的體液樣品或樣品量較大的樣品,，該類方法仍是經(jīng)濟(jì),、簡(jiǎn)便、快捷的監(jiān)測(cè)方法,。該方法目前已很少使用了,。

2.色譜法

色譜法目前是發(fā)展快、適用性zui強(qiáng)的一種方法,，發(fā)展前途的方法,。這類方法較光譜法大的優(yōu)勢(shì)就是它不僅具有*的定量作用，更具有一次分離多種樣品的作用,，加之這種方法靈敏度高,，能夠測(cè)到的藥物質(zhì)量濃度可達(dá)0.001～1μg·mL-1，尤其是近年來(lái)質(zhì)譜的發(fā)展使得監(jiān)測(cè)范圍更加擴(kuò)展,，達(dá)到1.0×10-9～1.0×-6μg·mL-1甚至更低,。

液相色譜(HPLC)法

HPLC法是目前臨床上用于監(jiān)測(cè)血藥濃度常用、有前景的方法,，在所查文獻(xiàn)中,，采用HPLC法監(jiān)測(cè)抗癲癇藥物的血藥濃度在所有方法中達(dá)到80%以上。這種方法檢測(cè)靈敏度、精密度高,，專一性強(qiáng),。并且HPLC法應(yīng)用范圍廣，可用于藥物研究的很多領(lǐng)域,，目前已越來(lái)越普及,，但這種方法對(duì)樣品的前處理要求非常高，主要是因?yàn)樯V柱做為分離,、分析樣品的重要載體,，對(duì)進(jìn)行分析的樣品純凈度要求非常高，大分子蛋白質(zhì)及其他大分子物質(zhì)必須處理*,，以zui大程度地減少對(duì)分析柱的柱效的影響,，延長(zhǎng)色譜柱的使用時(shí)間。

HPLC操作費(fèi)時(shí),，費(fèi)用相對(duì)較高,。目前針對(duì)色譜及光譜分析中樣品處理繁瑣的難題，已有色譜工作人員成功開(kāi)發(fā)出了在線凈化富集生物體液的填料柱,，在進(jìn)行樣品監(jiān)測(cè)時(shí)無(wú)需預(yù)處理,，蛋白質(zhì)等大分子物質(zhì)經(jīng)洗脫而不被保留，而小分子物質(zhì)可自由出入于固定相的疏水部分而得到分析,。這一方法省時(shí)省力,，近年來(lái)國(guó)內(nèi)外在HPLC系統(tǒng)中已廣泛采用SPE柱從而使得體液分析方法大為簡(jiǎn)化，但這種處理增加了樣品監(jiān)測(cè)的成本,。液-質(zhì)聯(lián)用技術(shù)的發(fā)展為樣品分析提供了廣闊的空間,，質(zhì)譜的聯(lián)用為色譜的進(jìn)一步發(fā)展提供了更為靈敏、準(zhǔn)確的技術(shù)支持,，在很大程度上擴(kuò)展了液相色譜的應(yīng)用范圍，如監(jiān)測(cè)血清中替米沙坦的濃度時(shí),，單用液相色譜法監(jiān)測(cè)時(shí),，低檢測(cè)限為20μg·L-1，但當(dāng)應(yīng)用液-質(zhì)聯(lián)用進(jìn)行監(jiān)測(cè)時(shí),，可將靈敏度提高到0.5μg·L-1,。

3.免疫法

目前采用免疫法監(jiān)測(cè)藥物濃度主要是利用蛋白競(jìng)爭(zhēng)的原理進(jìn)行監(jiān)測(cè)的。目前放射免疫法,，酶免疫法,、熒光免疫法是較常用于血藥濃度監(jiān)測(cè)的方法，國(guó)外監(jiān)測(cè)血藥濃度多以熒光偏振免疫法(FPIA法),、均相酶免疫法(EMIT)為主,，這類方法樣品處理簡(jiǎn)單，獲取結(jié)果時(shí)間較短，已成為臨床用于評(píng)判療效的一個(gè)重要依據(jù),。該類儀器多由國(guó)外研發(fā),，價(jià)格較貴，且僅局限于其研發(fā)后所能監(jiān)測(cè)的藥物,。但該類儀器仍因其獲取結(jié)果快速,、樣品處理簡(jiǎn)單、靈敏度高而受到臨床的重視,。目前也不是主要使用方法了,。