技術文章
日本島津LCMSMS法同時測定細菌培養(yǎng)上清液中95種化合物
閱讀:2600 發(fā)布時間:2017-12-27日本島津LCMSMS法同時測定細菌培養(yǎng)上清液中95種化合物
心怡創(chuàng)科技陪同客戶開發(fā)合適的培養(yǎng)基配方與優(yōu)化細胞培養(yǎng)條件是生物技術藥物生產工藝的核心內容之一,。適宜的培養(yǎng)基組成與優(yōu)選的細胞培養(yǎng)條件對于提高重組蛋白類藥物的產率,保證產品批次之間的一致性,、穩(wěn)定關鍵質量屬性等因素至關重要,尤其是ADC,、Bi-specific,、Fc Fusion Protein等相對分子量大、結構復雜的抗體類藥物,,對其重要性不言而喻,。對于培養(yǎng)基生產商和自行配制培養(yǎng)基的細胞培養(yǎng)公司而言,了解培養(yǎng)基中各組分在培養(yǎng)過程中的變化以及對目標產物質量和產量的影響至關重要,,因此我們需要盡可能多的了解培養(yǎng)基配方中各組分的含量在整個細胞培養(yǎng)過程中的變化趨勢,。
目前島津儀器在生物過程工藝開發(fā)與優(yōu)化偏重于檢測常規(guī)的溫度、攪拌,、氣體溶解量和OD值等理化條件以及少數培養(yǎng)成分與代謝物的變化,,缺乏對于細胞上清液組分直接、全面和快速的客觀動態(tài)數據分析,,因此無法優(yōu)化調整細胞培養(yǎng)工藝條件和培養(yǎng)基中各組分配比,。為滿足快速全面分析細胞培養(yǎng)上清液組分,將基礎碳源,、氮源,、核苷酸酸、維生素和其他主要代謝物一起檢測分析,,得到更多有關生物過程中的詳細信息,,我們開發(fā)出“細胞培養(yǎng)上清液方法包”,。該技術平臺采用超液相色譜三重四極桿液質聯用儀,僅需17分鐘,,即可同時監(jiān)測分析下列95種細胞培養(yǎng)上清液營養(yǎng)成份和代謝物的相對豐度變化,。
本文使用島津超液相色譜儀LC-30A和三重四極桿質譜LCMS-8050聯用,利用“細胞培養(yǎng)上清液方法包”建立了藤黃桿菌培養(yǎng)上清液中營養(yǎng)物質和細胞代謝物的液相色譜-串聯質譜的同時分析方法,,供相關人員參考,。
島津三重四極桿質譜LCMS-8050