氣相色譜法測定大豆油中脂肪酸成分

　　一,、目的與要求

　　油脂是食品加工中重要的原料和輔料,，也是食品的重要組分和營養(yǎng)成分。必需脂肪酸是維持人體生理活動的必要條件,，人體所必需的脂肪酸一般取自食品用油,，即食用油脂。氣相色譜法測定油脂脂肪酸組分是現(xiàn)在zui常用的方法,，也是一些相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)（如：GB/T17377）規(guī)定應(yīng)用的檢測方法,。

　　甲酯化是分析動植物油脂脂肪酸成分的常用的前處理方法，也是常用的標(biāo)準(zhǔn)方法（GB/T 17376-1998）,。

　　本實(shí)驗要求了解氣相色譜法測食用油脂肪酸組成的原理,，掌握樣品的前處理方法，學(xué)習(xí)食用油脂中脂肪酸組分的色譜分析技術(shù)。

　　二,、原理

　　本實(shí)驗甲酯化方法采用國標(biāo)--GB/T 17376-1998,，甘油酯皂化后，釋出的脂肪酸在3氟化硼存在下進(jìn)行酯化,，萃取得到脂肪酸甲酯用于氣象色譜分析,。

　　樣品中的脂肪酸（甘油酯）經(jīng)過適當(dāng)?shù)那疤幚恚柞セ┖螅M(jìn)樣,，樣品在汽化室被汽化,，在一定的溫度下，汽化的樣品隨載氣通過色譜柱,，由于樣品中組分與固定相間相互用的強(qiáng)弱不同而被逐一分離,，分離后的組分，到達(dá)檢測器（detceter）時經(jīng)檢測口的相應(yīng)處理（如FID的火焰離子化）,，產(chǎn)生可檢測的信號,。根據(jù)色譜峰的保留時間定性，歸一法確定不同脂肪酸的百分含量,。

　　三,、儀器與試劑

　　（一）儀器-

　　1．氣相色譜儀：,，配氫火焰離子化檢測器（FID）,。

　　2．恒溫水浴鍋

　　3．移液管

　　4．膠頭滴管

　　5．小圓底燒瓶

　　6．冷凝管

　　7. 樣品瓶

　　（二）試劑：.石油醚,、已醚,、氫氧化鉀、甲醇均為AR級,。

　　四,、實(shí)驗步驟

　　（一）樣品預(yù)處理

　　酯化測定：

　　取0.2g油樣于10ml容量瓶中,，家5.0ml   4:3石油醚-已醚,，使其溶解，在加4.0ml  0.5mol/L氫氧化鉀-甲醇溶液,，振搖1分鐘，放置8min后加水1.0ml,，靜止20min使之分層,，取上層液注入色譜儀，保留時間定性,，面積歸一化法定量,。

　　測定：

　　（1）氣相色譜條件

　　①色譜柱：石英彈性毛細(xì)管柱,，0.32mm（內(nèi)徑）×30m,，內(nèi)膜厚度0.5um。

　?、诔绦蛏郎兀?150℃保持3min,，5℃/min升溫至220℃，保持10min,；進(jìn)樣口溫度250℃,；檢測器溫度300℃。

　?、蹥怏w流速：氮?dú)猓?0mL/min,，氫氣：40mL/min，空氣：450mL/min,，分流比30﹕1,。

　　④柱前壓：25kpa

　?。?）色譜分析

　　自動進(jìn)樣,，吸取0.4-1μL試樣液注入氣相色譜儀，記錄色譜峰的保留時間和峰高,。利用標(biāo)準(zhǔn)圖譜確定每個色譜峰的性質(zhì)（定性）,，利用軟件自帶的自動積分方法計算各脂肪酸組分的百分含量。

　　五,、鑒別

　　1.測定常見植物油主要脂肪酸的構(gòu)成比并查閱有關(guān)資料,，經(jīng)統(tǒng)計學(xué)處理，不同的植物油主要脂肪酸的組成大部分有相同之處,，但是主要脂肪酸的含量是不相同的,。根據(jù)脂肪酸組成與含量，即可鑒別油品種類,。

　　2.氣相色譜法測定脂肪酸,，通常用硫酸-甲醇法，和AOAC-IUPAC 標(biāo)準(zhǔn)法,，我們采用了氫氧化鉀-甲醇法,，經(jīng)試驗3種方法測定結(jié)果差異無顯著性。