液相色譜儀操作步驟：
1)．過濾流動相,，根據(jù)需要選擇不同的濾膜。
2)．對抽濾后的流動相進行超聲脫氣10-20分鐘,。
3)．打開HPLC工作站(包括計算機軟件和色譜儀),，連接好流動相管道,，連接檢測系統(tǒng)。
4)．進入HPLC控制界面主菜單,，點擊manual,，進入手動菜單。
5)．有一段時間沒用,，或者換了新的流動相,，需要先沖洗泵和進樣閥。沖洗泵,，直接在泵的出水口,，用針頭抽取。沖洗進樣閥,，需要在manual菜單下,，先點擊purge，再點擊start,，沖洗時速度不要超過10ml/min,。
6)．調(diào)節(jié)流量，初次使用新的流動相,，可以先試一下壓力,，流速越大，壓力越大,，一般不要超過2000。點擊injure,，選用合適的流速,，點擊on，走基線,，觀察基線的情況,。
7)．設(shè)計走樣方法。點擊file,，選取selectusersandmethods,，可以選取現(xiàn)有的各種走樣方法。若需建立一個新的方法,，點擊newmethod,。選取需要的配件，包括進樣閥,，泵,，檢測器等，根據(jù)需要而不同,。選完后,，點擊protocol,。一個完整的走樣方法需要包括：a.進樣前的穩(wěn)流，一般2-5分鐘,；b.基線歸零,；c.進樣閥的loading-inject轉(zhuǎn)換；d.走樣時間,，隨不同的樣品而不同,。
8)．進樣和進樣后操作。選定走樣方法,，點擊start,。進樣，所有的樣品均需過濾,。方法走完后,，點擊postrun，可記錄數(shù)據(jù)和做標(biāo)記等,。全部樣品走完后,，再用上面的方法走一段基線，洗掉剩余物,。
9)．關(guān)機時,，先關(guān)計算機，再關(guān)液相色譜,。
10)．填寫登記本,，由負(fù)責(zé)人簽字。

液相色譜儀注意事項：
1)．流動相均需色譜純度,，水用20M的去離子水,。脫氣后的流動相要小心振動盡量不引起氣泡。
2)．柱子是非常脆弱的,，*次做的方法,，先不要讓液體過柱子。
3)．所有過柱子的液體均需嚴(yán)格的過濾,。
4)．壓力不能太大,，不要超過2000psi。