梯度液相色譜儀是一款新型的液相色譜儀,,梯度系統(tǒng)的應用范圍比等度系統(tǒng)更廣,,等度系統(tǒng)不能很好分離的物質(zhì),使用梯度程序便能迎刃而解,,可設定自動清洗程序而不需手動更換流動相,,使色譜柱的清洗更方便,,廣泛用于研究開發(fā)、醫(yī)藥檢驗,、食品檢測,、化工分析、環(huán)境監(jiān)測等眾多分析領域,。
梯度洗脫又稱為梯度淋洗或程序洗脫,。氣相色譜中為改善對寬沸程樣品的分離和縮短分析周期,廣泛采用程序升溫的方法,。而在液相色譜中則采用梯度洗脫的方法,。在同一個分析周期中,按一定程度不斷改變流動相的濃度配比,,稱為梯度洗脫,。從而可以使一個復雜樣品中的性質(zhì)差異較大的組分能按各自適宜的容量因子k達到良好的分離目的。
梯度洗脫原理是流動相由幾種不同極性的溶劑組成,,通過改變流動相中各溶劑組成的比例改變流動相的極性,,使每個流出的組分都有合適的容量因子k,并使樣品種的所有組分可在最短時間內(nèi)實現(xiàn)最佳分離,。
梯度洗脫可提高柱效,,改善檢測器的靈敏度。當樣品中的一個峰的k值和最后一個峰的k值相差幾十倍至幾百倍時,,使用梯度洗脫效果特別好,。梯度洗脫中為保證流速的穩(wěn)定,必須使用恒流泵,,否則難獲重復結果,。梯度洗脫常用一個弱極性的溶劑A和一個強極性的溶劑B。
梯度液相色譜儀洗脫應滿足以下要求:
1.洗脫液體積應足夠大,,一般要幾十倍于床體積,,從而使分離的各峰不致于太擁擠。
2.梯度的上限要足夠高,,使緊密吸附的物質(zhì)能被洗脫下來,。
3.梯度不要上升太快,要恰好使移動的區(qū)帶在快到柱末端時達到解吸狀態(tài),。
目的物的過早解吸,,會引起區(qū)帶擴散;而目的物的過晚解吸會使峰形過寬,。