葛根為豆科植物野葛 Pueraria lobata (Willd.) Ohwi的干燥根,是常用中藥材,具有解肌退熱,，生津,，透疹,，升陽止瀉功效,，用于外感發(fā)熱頭痛,、項背強(qiáng)痛,，口渴，消渴,，麻疹不透,，熱痢，泄瀉,，高血壓頸項強(qiáng)痛等[1]?，F(xiàn)代研究證實(shí)，葛根中的主要有效成分為葛根素等異黃酮類化合物，具有抗炎解熱,、擴(kuò)張冠狀動脈血管,、增加冠狀動脈血流量的作用，同時也有降低血壓的作用,。有關(guān)葛根中葛根素等異黃酮的含量測定研究已有不少報道[2-5],，但對葛粉中葛根素含量測定報道不多。本文對葛粉中葛根素的提取條件和測試條件等進(jìn)行比較研究,并采用液相色譜法對葛粉樣品進(jìn)行了定量分析, 結(jié)果令人滿意,。

  　 1 實(shí)驗(yàn)部分

  　 1.1 儀器與試劑

  　 LC－10tvp液相色譜儀,；SPD－10T紫外檢測器；N2010色譜工作站,，島津UV－265紫外分光光度儀,，多功能榨汁機(jī)/攪拌機(jī)SG300－I。甲醇（色譜純）,，水（二次蒸餾）,，其余均為分析純。葛根素對照品（中國藥品生物制品檢定所）,；鮮葛,。

  　 1.2 色譜條件

  　用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；色譜柱Vertex C18 (150×4.6mm I.D),，MeOH－H2O－HAc（30：70：0.5）為流動相,，紫外檢測波長250nm。

  　 2 結(jié)果與討論

  　 2.1 提取溶劑濃度的選擇

  　精密稱取同一樣品約0.1g,分別加30%乙醇,、50%乙醇和80%乙醇10ml,，超聲提取60分鐘，進(jìn)樣5ul,比較峰面積,，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明30%乙醇提取,。

  　 2.2 超聲提取時間的選擇

  　精密稱取同一樣品約0.1g,分別加30%乙醇10ml，超聲提取30分鐘,、45分鐘,、60分鐘，進(jìn)樣5ul,比較峰面積,，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明超聲60分鐘為*提取條件,。

  　 2.3 流動相及流速的選擇

  　 試驗(yàn)時曾采用下述流動相進(jìn)行測定：甲醇－水（25：75）、甲醇－水－醋酸（30：70：0.5）,、甲醇－水（30：70）為流動相,，結(jié)果采用甲醇－水－冰醋酸（30：70：0.5）為流動相，樣品分離好,。而流速也以1.0ml/min為合適,。

  　 2.4 標(biāo)樣溶液的制備

  　稱取一定量葛根素對照品,用30%乙醇溶解配制成濃度為13ug/ml的葛根素標(biāo)準(zhǔn)液,。

  　 2.5 葛粉制備

  　取鮮葛用水洗凈切片,稱取20g放入攪拌機(jī)內(nèi)，攪拌三次,，每次1分鐘，每次加水200ml,， 150ml,，100ml，合并漿汁放置二天,，去掉上面的水,，下面的粉漿用定量濾紙過濾，低溫干燥,，放入干燥器中備用,。

  　 2.6 供試品溶液制備

  　稱取一定量葛粉于10mL容量瓶中,加30%乙醇10ml,超聲提取1h,濾紙過濾,濾液過0.45um濾膜作為供試品溶液。

  　 2.7 線性關(guān)系考察

  　 在上述色譜條件下,，分別進(jìn)標(biāo)樣溶液0.5,、3、5,、7,、10μl，測得各峰面積,。以葛根素為橫座標(biāo)（A）,，以峰面積（Y）為縱座標(biāo)，計算得回歸方程：Y=3.90×106x+728.14,相關(guān)系數(shù)r＝0.9999,；結(jié)果紫外檢測葛根素在0.0065-0.13μg范圍內(nèi)呈良好線性關(guān)系,。

  　 2.8 精密度試驗(yàn)

  　取上述標(biāo)樣溶液，連續(xù)進(jìn)樣5次,，測定,，RSD為1.11%。

  　 2.9 重復(fù)性試驗(yàn)

  　取同一樣品重復(fù)測定5次,，RSD為1.61%,。

  　 2.10 穩(wěn)定性試驗(yàn)

  　取上述供試品溶液，0,、2,、5、7,、10h進(jìn)樣,，RSD為2.1%，10小時內(nèi)進(jìn)樣穩(wěn)定,。

  　 2.11 回收率試驗(yàn)

  　 取已知含量的樣品,，分別加入葛根素標(biāo)樣，按上述方法測定5次，平均回收率為98.6%, RSD為1.76%,。見表1,。

  　 2.12 樣品分析

  　精密吸取標(biāo)樣溶液5μl與供試品溶液5μl，注入液相色譜儀,，測定,，結(jié)果:葛粉中葛根素的含量為0.06%（n=3），見下圖,。

  　 3 討論

  　本文采用液相色譜法測定葛粉中葛根素的含量,方法簡單,、快速、準(zhǔn)確,，結(jié)果滿意,，可用于葛粉中葛根素的含量測定。