液相色譜法測定動物組織中抗生素殘留量
液相色譜法測定動物組織中抗生素殘留量采用EDTA+磷酸(1+1)-三氯乙酸提取,,應(yīng)用C18固定柱富集、凈化,,以取得較好的分離效果,。然后以保留時間定性,以峰面積定量,。具體檢測方法如下:
樣品的提取
四環(huán)素,、土霉素的提取,。稱取10.0g樣品于100mL比色管中,加入0.01mol/L EDTA二鈉-0.04mol/l磷酸(1:1)混合液30mL,搖勻,再加入50%三氯乙酸2mL,,搖勻,用EDTA-磷酸混合液定容至50mL,,樣品液全部轉(zhuǎn)移至勻漿瓶中,,用組織勻漿機高速勻漿1min,勻漿液于45℃以下水浴保溫15min,,待靜置分層后,,離心10min(2500r/min),上層清液過濾,,收集濾液25mL備用,。用2mL甲醇潤濕Sep-Pak C18柱,字啊用10ml蒸餾水置換,,然后依次用5%EDTA二鈉水溶液5mL,、10mL蒸餾水流過。將濾液通過Sep-Pak C18柱,,分4次用10mL蒸餾水沖洗,加10mL甲醇溶出,,溶出液用液相色譜儀分析,。
氯霉素的提取。
稱取10.0g樣品于100mL比色管中,,加入磷酸鹽緩沖液30mL,,搖勻,慢慢加入50%三氯乙酸溶液,,用磷酸鹽緩沖溶液定容至50mL,,樣品液全部轉(zhuǎn)移至勻漿瓶,用組織勻漿機高速勻漿1min,,室溫下放置15min,,過濾,收集濾液,,經(jīng)0.45μm濾膜再過濾,,取濾液進行液相色譜分析。
測定后,,比較其峰面積,,利用外標法定量,。