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　　小鼠胚胎成纖維細(xì)胞用于支持鼠和人多功能干細(xì)胞的生長(zhǎng),。該細(xì)胞不僅能提供多能性干細(xì)胞生長(zhǎng)的物質(zhì)，也能分泌維持干細(xì)胞多能性的關(guān)鍵生長(zhǎng)因子,。該細(xì)胞從大鼠胚胎中分離,，并在早期起作用。作為飼養(yǎng)層細(xì)胞,，必須通過輻射阻止該細(xì)胞的增殖,。經(jīng)處理的細(xì)胞也能用于產(chǎn)生有用的培養(yǎng)基,，用于自由飼養(yǎng)的多能性干細(xì)胞的培養(yǎng)。  

　　小鼠胚胎成纖維細(xì)胞培養(yǎng)方法：

 

　　傳代方法 將舊培養(yǎng)液吸除,，PBS清洗兩遍后,，加入6mL(/100mm皿)胰酶，在顯微鏡下觀察,，期間禁止搖晃培養(yǎng)皿,，細(xì)胞剛有脫落時(shí)，則吸除大部分胰酶,，留約0.5mL,，移至培養(yǎng)箱消化，約3min取出,。傳代用12mL CM1-1培養(yǎng)液終止消化,，輕輕吹打均勻細(xì)胞，后可分3~6皿培養(yǎng),；
 

　　生長(zhǎng)條件 ：37℃,，5%CO2，CM1-1培養(yǎng)液,。CM1-1培養(yǎng)液：90%DMEM-H+10?S,。DMEM-H：DMEM高糖培養(yǎng)液，含谷氨酰胺,，丙酮酸鈉,。
 

　　存儲(chǔ)條件：凍存則用6mL凍存液(90?S+10%DMSO)終止消化，吹打均勻,，分為6支凍存管,，用程序降溫盒于-80℃凍存，過夜移至液氮中保存,。