磁珠分選細胞標記及分選策略

• 磁珠分選原理

磁珠分選是基于細胞表面抗原能與偶聯(lián)抗體的磁珠性結合,，從而使細胞被標記,。標記好的細胞過柱子（柱子周圍連磁鐵）時,，帶磁珠的細胞留在柱子上,，不帶磁珠的細胞流走了,，從而實現(xiàn)目的細胞的分選,。

二、細胞標記方式

利用磁珠分選細胞的關鍵點是細胞標記,。標記方式有兩種,，包括直接標記和間接標記。

1,、  直接標記

直接標記是標記目的細胞，是較,、較的磁性標記方法,。目前有多種分選人、小鼠,、大鼠以及非人類靈長類細胞的MACS直標微珠可供選用,。

2、  間接標記

間接標記是標記非目的細胞,，需要聯(lián)合使用單克隆或多克隆抗體和微珠,。未結合抗體、生物,、化抗體或熒光素標記抗體均可作為一抗標記細胞,，再使用抗球蛋白微珠,、抗或鏈霉親和素微珠、抗熒光素微珠等作為二抗磁性標記細胞,。

三,、磁珠分選策略

根據(jù)細胞標記方式可以選擇不同的磁珠分選策略。

1陽性分選

陽性分選是目的細胞被磁性標記,，并直接分選出來,，標記的細胞可富集10000倍。分選后的細胞不必微珠,，可立即培養(yǎng)或后續(xù)操作,，其特點是，回收率高,，操作迅速,，操作簡便。

2陰性分選

陰性分選又叫分選,，磁性標記非目的細胞,，從而將非目的細胞從細胞混合物中。其適用范圍包括以下幾個方面：

① 不需要細胞,；

② 缺乏針對目的細胞的性抗體（如細胞）,；

③ 不需要抗體和目的細胞結合，如T細胞,、B細胞,、NK細胞功能分析；

④ 需要進一步通過陽性選擇分選細胞亞群,。

3復合分選

復合分選其實是陰性分選和陽性分選的結合,。如先陰性分選，非目的細胞,，然后再陽性分選,，獲取目的細胞。這種分選策略的適用范圍包括：

①非目的細胞也表達用來陽性分選目的細胞的抗原,；

② 要分選,、珍貴細胞，先非目的細胞再陽性分選,，可獲得度目的細胞,。

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