磁珠法分離細(xì)胞原理/MACS微珠/MACS分選柱

磁珠法分離細(xì)胞原理
        磁珠法分離細(xì)胞是基于細(xì)胞表面抗原能與連接有磁珠的性單抗相結(jié)合,，在外加磁場中,，通過抗體與磁珠相連的細(xì)胞被吸附而滯留在磁場中，無該種表面抗原的細(xì)胞由于不能與連接著磁珠的性單抗結(jié)合而沒有磁性,，不在磁場中停留,，從而使細(xì)胞得以分離。

二,、MACS微珠（MicroBeads）
        MACS微珠是一種與高度性單克隆抗體相偶聯(lián)的順磁化微粒,，用于目的細(xì)胞分離或者細(xì)胞的磁性標(biāo)記。微珠直徑約有50nm,，比細(xì)胞小200多倍，體積為細(xì)胞的百萬分之一,，光學(xué)顯微鏡下不可見,。微珠由多聚糖和氧化鐵組成，性,，對細(xì)胞無損傷,，可以生物降解。MACS微珠與流式細(xì)胞儀兼容,，不會影響細(xì)胞的光散射性質(zhì),；磁性標(biāo)記只占用20－30％的結(jié)合位點，不影響細(xì)胞的熒光抗體標(biāo)記,。此外,，MACS微珠可以較大限度地避免細(xì)胞活化；解離磁珠,，可以直接進(jìn)行后續(xù)實驗：如流式細(xì)胞儀分析或分選,、細(xì)胞培養(yǎng)、分子生物學(xué)研究,、回輸給人或者動物,。
         MACS微珠主要有三種：直標(biāo)微珠,、間標(biāo)微珠、多選微珠,。其中間標(biāo)微珠有抗球蛋白微珠,、抗微珠或鏈霉親和素微珠、抗熒光素微珠,。多選微珠是為分選細(xì)胞亞群而研制的一種微珠,。這種微珠通過的方式與抗體偶聯(lián)，在一次陽性分選完成后,，與細(xì)胞結(jié)合的多選微珠可以被解離試劑剪切下來,，陽性分選的細(xì)胞可以進(jìn)行再次陽性分選或者分選。

三,、MACS分選柱（Separation Column） 
         MACS分選柱是一類填充有不同規(guī)格鐵珠的塑料容器,，鐵珠表面有親水包被，因此不會損傷細(xì)胞,。在磁場外MACS分選柱不帶有磁性,，但是當(dāng)置于一個磁場—MACS分選器中時，分選柱內(nèi)的鐵珠可以使分選器的磁場1000倍,，滯留標(biāo)記有量微珠的目的細(xì)胞,；磁性標(biāo)記細(xì)胞從分選柱中通過時可以受到均勻的磁力作用，從而分選純度和回收率,。手動操作在30分鐘內(nèi)可完成,，自動分選2.5-10分鐘，得到的細(xì)胞可立即用于后續(xù)實驗,。此外,，大多數(shù)MACS分選柱都是無菌包裝，一次性使用,，可以滿足細(xì)胞培養(yǎng)所需的無菌條件,。

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