Fe3O4-NH2氨基化四氧化三鐵納米粒子的細胞性等級
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齊岳生物MTT法評價Fe3O4-NH2納米粒子的性分級
將配制好的五組不同濃度的Fe3O4溶液6.40、12.80,、25.60,、51.20、102.4 μg/mL以及對照組六組溶液各取100 μL加入到96孔板的中間60個孔中,,每個不同的濃度都加6個復孔,,培養(yǎng)20 h后,加入100 μL濃度為0.5 mg/mL MTT,,培養(yǎng)4 h,將上層的培養(yǎng)液吸去之后,,每個孔中分別加入110 μL的DMSO,,振蕩5 min,將MTT與活細胞之間產生的甲臜*溶解,,然后用酶標儀在490 nm處測定不同濃度下的吸光度,。計算細胞活力,,評價Fe3O4溶液的性大小。
Fe3O4-NH2的細胞性評價
根據酶標儀測得的每孔細胞吸光度值(A),,按照公式計算細胞相對增殖率(RGR):
RGR=實驗組A/隱性對照組A×
依據得到的RGR值判斷納米材料的細胞性等級,,RGR值:≥為0級,75%~99%為Ⅰ級,,50%~74%為Ⅱ級,,25%~49%為Ⅲ級,1%~24%為Ⅳ級,,0時為Ⅴ級,。0~1級沒有細胞性,2級具有輕度細胞性,,3~4級為中度細胞性,,5級則為重度細胞性。MTT法進行細胞的活性檢測結果見表1,,其結果同樣顯示Fe3O4的細胞性呈濃度依賴型,,隨著0、6.40,、12.80,、25.60、51.20,、102.4 μg/mL 六組濃度的依次上升,, RGR值呈現(xiàn)出下降的趨勢,細胞活力逐漸降低,。SPSS統(tǒng)計分析結果與性分級見表2,,從表2中可以看出作用20 h后,與對照組相比,,51.20,、102.4 μg/mL兩組的細胞活力下降,細胞活力分別為65.73%和36.77%,,將各個濃度的細胞性進行分級之后發(fā)現(xiàn),,在6.40、12.80,、25.60 μg/mL幾組較低濃度組的細胞性都為Ⅰ級,,認為在這幾組濃度值當中,F(xiàn)e3O4-NH2不表現(xiàn)出細胞性,;在51.20 μg/mL中分級為Ⅱ級,,認為具有較輕細胞性,應結合細胞形態(tài)綜合評價,;在102.4 μg/mL中分級為Ⅲ級,,有較高的細胞性,。實驗結果表明濃度低于51.20 μg/mL時,F(xiàn)e3O4-NH2具有較好生物相容性,,在生物醫(yī)學應用方面具有較高的性,。
結論:以共沉淀法制備了Fe3O4納米粒子,APTES經水解,,在 Fe3O4納米粒子表面修飾上了氨基,,制備了Fe3O4-NH2納米粒子,經TEM和FT-IR表征,,納米粒子分散性,,氨基成功修飾在了納米粒子的表面。以胃SGC-7901為目的細胞,,依據RGR值考察了Fe3O4-NH2納米粒子的細胞性等級,,結果顯示,在濃度范圍內,,細胞死亡率與Fe3O4-NH2納米粒子的濃度成正相關,,F(xiàn)e3O4-NH2納米粒子的濃度越大,對細胞的性也越大,,細胞的死亡率也越高,,低劑量的情況下,F(xiàn)e3O4-NH2納米粒子的細胞性相對較小,。低濃度的Fe3O4-NH2納米顆粒具有較好的生物相容性,,可以被應用在生物醫(yī)藥領域。
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