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辣根過氧化物酶標(biāo)記鏈霉親和素HRP-Streptavidin實(shí)驗(yàn)步驟
西安齊岳生物提供辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記前列腺素E2、前列腺素A2、氯磺隆,、、,、雌二醇,、睪酮、孕酮,、生育酚,、B6、A,、膽鈣化醇,、麥角鈣化甾醇、,、黃素單核苷酸,、核黃素、、新二氫查爾酮,、重樓皂苷,、松香酸、香草酸,、漢,、、辣椒素,、,、蘆丁、等小分子科研,。
中文名稱:辣根過氧化物酶標(biāo)記鏈霉親和素
英文名稱:HRP-Streptavidin
本制品可以用于(Biotin)標(biāo)記的抗體,、核酸、蛋白或其它標(biāo)記分子的檢測,。具體用途包括Western,、ELISA、組化或細(xì)胞化學(xué),、原位雜交,、Southern、Northern,、EMSA等,。
本制品用度的Streptavidin和純的辣根過氧化物酶交聯(lián)而成,產(chǎn)生低的本底和高的靈敏度,。本產(chǎn)品的濃度為1mg/ml,。
Streptavidin的分子量為66kD,可以高度性地和(Biotin)結(jié)合,。Streptavidin和的親和常數(shù)為Kd=10-15M,。Streptavidin是一個(gè)4聚體蛋白,可以同時(shí)結(jié)合4個(gè)分子,。Streptavidin的中文名為鏈霉親和素,,從Streptomyces adidinii中純化獲得,和雞蛋清來源的Avidin(親和素)在空間結(jié)構(gòu)以及與的親和力方面具有高度的相似性,。和Avidin不同的是,,Streptavidin是一種非糖基化蛋白,并且基本不帶電荷,。Avidin的pI=~10.5,,在中性pH條件下呈堿性。由于Streptavidin和Avidin相比在中性條件下不帶電荷,,因此Streptavidin的非性結(jié)合比Avidin低很多,,這樣檢測時(shí)的非性背景低很多,。因此目前在檢測時(shí)通常使用Streptavidin替代Avidin。
辣根過氧化物酶(HRP)可以在Western,、EMSA,、Southern或Northern等檢測時(shí)催化ECL類試劑(如ECL、BalbECL系列等)產(chǎn)生化學(xué)發(fā)光,,可以在ELISA時(shí)催化TMB產(chǎn)生藍(lán)色,,也可以在組化、細(xì)胞化學(xué)或Western blot檢測時(shí)催化DAB產(chǎn)生棕色沉淀,。
本制品用于常規(guī)用途的稀釋倍數(shù)參考下表,,實(shí)際實(shí)驗(yàn)操作過程中需根據(jù)具體情況適當(dāng)調(diào)節(jié)辣根過氧化物酶標(biāo)記Streptavidin的稀釋比例。
WB | IHC/IC/ISH | ELISA | Southern/Northern | EMSA |
2000-10000 | 200-500 | 2000-10000 | 2000-5000 | 2000-5000 |
本制品如果用于常規(guī)的Western檢測,,以每次檢測需10毫升1:2000稀釋的本產(chǎn)品計(jì),,可以檢測40次。
注意事項(xiàng):
1.疊氮鈉會(huì)辣根過氧化物酶的活性,,在含有辣根過氧化物酶的溶液中不可加入疊氮鈉,。
2.本產(chǎn)品于人員的科學(xué)研究用,不得診斷或,,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內(nèi),。
3.為了您的和健康,,請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
保存條件:-20℃保存,,一年,。
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