熒光光譜儀的原理和應用
目前熒光分析法已經(jīng)發(fā)展成為一種重要且有效的光譜化學分析手段,。在我國,,50年代初期僅有極少數(shù)的分析化學工作者從事熒光分析方面的研究工作,,但到了70年代后期,熒光分析法已引起國內(nèi)分析界的廣泛重視,,在全國眾多的分析化學工作者中,,已逐步形成一支從事這一領(lǐng)域工作的隊伍。
一,、熒光分析特點
(1)熒光分析的主要特點是靈敏度高,、選擇性好,熒光分析的靈敏度要比吸收光譜測量高2-3個數(shù)量級,。分光光度法通常在10-7級,,而熒光的靈敏度達10-9。
(2)強選擇性強,,熒光物質(zhì)具有兩種特征光譜:激發(fā)光譜和吸收光譜,,相對于分光光度法單一的吸收光譜來說,熒光光譜可根據(jù)激發(fā)光譜和發(fā)射光譜來鑒定物質(zhì)。
(3)信息量豐富,,能提供熒光物質(zhì)的多種參數(shù),。
(4)但是熒光分析方法也有其不足之處:①很多物質(zhì)本身不發(fā)熒光;②熒光的產(chǎn)生與化合物結(jié)構(gòu)的關(guān)系不明確,;③干擾因素多,,光分解、氧淬滅,、易污染,。
二、主要應用領(lǐng)域
(1)在生物領(lǐng)域的應用
該領(lǐng)域主要用于臨床測定生物樣品中某些成分的含量,,生物技術(shù)及免疫技術(shù)的分析等,,如脫氧核糖和脫氧核糖核酸的含量測定、DNA,、抗體,、抗原等各方面的研究。在此領(lǐng)域中主要時利用各種熒光探針進行分析檢測,,主要分為生物納米熒光探針和生物非納米熒光探針,。
其中納米技術(shù)的興起,打開了熒光分析的又一個新的領(lǐng)域,。由于納米材料具有很好的熒光性,,寬激發(fā),窄發(fā)射等優(yōu)良的光譜特點,,使其成為熒光分析中的重要的研究對象,,引起了研究者的興趣。
(2)在食品領(lǐng)域的應用
該領(lǐng)域主要用于食品中礦物質(zhì)及金屬元素,、氨基酸,、維生素、菌類污染,、添加劑,、防腐劑、食品包裝有害物質(zhì),、農(nóng)藥殘留等的分析檢測,。特別是與HPLC、TLC,、FIA等技術(shù)的結(jié)合可以更好的達到食品中各種物質(zhì)的檢測效果,。
目前我國食品標準日趨化,對于食品分析的要求也越來越趨向于靈敏和微量化,。熒光分析正可以滿足這方面的分析要求,。
(3)在藥物分析中的應用
藥物分析領(lǐng)域可以利用熒光分析進行藥物的有效成分鑒定、藥物代謝動力學研究、臨床藥理藥效分析等,。藥物熒光分析可以分為三類:直接熒光分析,、間接熒光分析和納米熒光分析。常規(guī)熒光分析法早被應用于分析抗瘧疾藥物奎寧,,隨著熒光分析法的發(fā)展,,其應用范圍日益擴大,目前被廣泛用于抗菌素藥物,、止痛藥,、鎮(zhèn)靜劑、止血藥等的分析,。
(4)在環(huán)境分析中的應用
該領(lǐng)域主要利用熒光分析檢測環(huán)境中的物質(zhì)的含量,,主要是對水體、礦石和土壤進行檢測,。隨著有機化工、石油化工,、醫(yī)藥工業(yè)的發(fā)展,以及農(nóng)藥(殺蟲劑,、除草劑等)的大量使用,有機化合物對環(huán)境的危害和污染日益嚴重。
目前被列入有機污染物監(jiān)測國家標準方法中的熒光分析法有,;冷原子熒光法對有機汞的測定,;乙酰化濾紙層析熒光分光光度法對大氣飄塵和水體中苯并(a)芘的測定,;酚類,、木質(zhì)磺酸酯、多環(huán)芳烴(芘,、螢,、蒽)[PASH]的熒光分析法測定等。