拒絕疏水塌陷,,解密AQ柱
做色譜分析的小伙伴們都知道,反相色譜(RP-HPLC)是應(yīng)用最為廣泛的一種分離模式,,它可以分析從低極性到中高極性的多數(shù)化合物,,常用的鍵合相類型有C18,、C8和苯基等。然而,,反相色譜也有它的一個(gè)使用局限性:就是一些大極性化合物在常規(guī)反相中保留較弱,,從而無(wú)法進(jìn)行后續(xù)的定性與定量分析。
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首先,,最容易想到的是通過(guò)增加流動(dòng)相中水相的比例以減弱洗脫強(qiáng)度,從而增加極性化合物的保留,。一般來(lái)說(shuō),,分析物的極性越大,流動(dòng)相中水的比例也需要更高,。那么問(wèn)題來(lái)了,,對(duì)于一些常規(guī)的C18柱在高比例乃至純水相中耐受不好,很容易發(fā)生孔內(nèi)干涸,,也就是我們常說(shuō)的“疏水塌陷",。一旦發(fā)生很容易出現(xiàn)色譜柱保留減弱等問(wèn)題。