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哈嘍，小伙伴們,，還記得上個世紀(jì)五,、六十年代震驚世界的“反應(yīng)停事件"嗎？反應(yīng)停學(xué)名為沙利度胺Thalidomide,，結(jié)構(gòu)見下圖,，其消旋體曾被用作緩解妊娠反應(yīng)的藥物。但是后來才發(fā)現(xiàn)其中的R-型異構(gòu)體才是有效的抗嘔吐成分,，可減輕妊娠e心,、嘔吐等癥狀；而S-型異構(gòu)體則會導(dǎo)致嬰兒畸形,，結(jié)果當(dāng)時在西德,、荷蘭和日本等地區(qū)產(chǎn)生了大批的畸形兒。

隨著生物工程和生命科學(xué)的發(fā)展,，科學(xué)家已經(jīng)認(rèn)識到,，手性化合物例如手性藥物異構(gòu)體盡管其物理和化學(xué)性質(zhì)幾乎wan全相同，只有旋光性不同,，但它們在生物體內(nèi)的生理活性和藥理作用卻存在很大的差別,。為此，制藥行業(yè)中,，必須對有效成分的對映體進(jìn)行拆分,，而不能將其混合物作為藥物出售。 

采用液相色譜法分離手性化合物,，是目前shou選方法之一,，要考慮手性柱的固定相類型、分離模式及流動相溶劑?，F(xiàn)在市面上手性固定相類型較多,，手性色譜有正相分離和反相分離兩種模式，流動相溶劑的選擇與固定相,、樣品性質(zhì),、分離模式有關(guān)。今天,，小編就和大家聊聊,，如何選擇合適的手性分離模式。

當(dāng)樣品溶于非極性溶劑中,，選擇正相分離模式,。常用的流動相組合是烷烴類和醇類。其中,，醇類起到了洗脫作用,，烷烴類用來調(diào)節(jié)流動相的洗脫強(qiáng)度,。

烷烴類試劑，可選擇正己烷,、正戊烷,、異己烷、正庚烷,，它們對樣品分離沒有太大影響,，不會改變選擇性和分離度，選擇正己烷較多,。

流動相中的醇類,，對目標(biāo)物的分離起關(guān)鍵作用，不同的醇有不同的選擇性,，且隨著流動相中醇類的比例提高,，目標(biāo)峰的保留時間縮短。zui常用的醇類是乙醇和異丙醇,，它們的洗脫能力是：乙醇>異丙醇,。甲醇在烷烴中的溶解性不好，正己烷中甲醇的最大含量是5%,。如果要在烷烴中加入甲醇,，最好同時加入一定量的乙醇，提高流動相的溶解性,。

在手性色譜中,，為改善目標(biāo)物的峰形，需要在流動相中添加酸或者堿,。如果目標(biāo)物是酸性化合物,，往往要在流動相中加入酸性添加劑，如三氟yi酸,、乙酸,、甲酸等。如果目標(biāo)物是堿性化合物,，要在流動相中加入堿性添加劑,，如二乙胺、三乙胺,、丁胺、乙醇胺等,。酸性或堿性添加劑的加入量一般為0.1%~0.3%,，最大不超過0.5%，要注意色譜柱的pH耐受范圍,。

需要注意的是：

1,、正相色譜柱安裝前,，必須先用合適的流動相沖洗整個儀器管路，包括進(jìn)樣器,。有些試劑（如丙酮,、氯仿、二甲基甲酰胺（DMF）,、二甲基亞砜,、乙酸乙酯、二氯甲烷,、THF）會破壞手性固定相的結(jié)構(gòu),，請不要使用這些溶劑作為流動相的組成部分，或者作為樣品稀釋劑,。如果有無法確定的,，請咨詢廠家。

2,、色譜柱能使用純甲醇或者純乙腈作為流動相,，如果要將正己烷換成甲醇或者乙腈，或者換成其他極性溶劑,，需要用純異丙醇作為溶劑充分過渡,。

3、正相手性柱應(yīng)避開含水的流動相,。

溴甲ji苯異丙酸消旋體的測定

液相條件

色譜柱：Ultimate^® Cellu-J（4.6×250mm,，5μm)  。 

流動相：正己烷：乙醇：三氟yi酸（90：10：0.1）,；

檢測波長：220nm,；

柱溫：25℃；

流速：1mL/min,；

進(jìn)樣量：10μL,；

樣品配置：1mg/mL，乙醇/正己烷（1/1）溶解,。

如果樣品溶于含水極性溶劑時,，選擇反相分離模式。常用的流動相組合是有機(jī)相和水相,。其中,，水相用來調(diào)節(jié)流動相的洗脫強(qiáng)度，常用的水相可以是磷酸鹽緩沖液,，或者是純水,。有機(jī)相起到了洗脫作用，常用的有機(jī)相是乙腈,、甲醇,、乙醇,、異丙醇等，且有機(jī)相比例越高,，目標(biāo)物的保留時間越短,。

鹽酸達(dá)泊xi汀的測定

液相條件

色譜柱：Ultimate^® Cellu-JR（4.6×250mm，5μm)  ,。 

流動相：甲醇：乙醇：二乙胺（95：5：0.1）,；

檢測波長：220nm；

柱溫：20℃,；

流速：0.6mL/min,；

進(jìn)樣量：5μL；

樣品配置：1mg/mL,，甲醇溶解,。

目前，月旭科技的手性固定相填料包括 Cellu-D,、Cellu-J,、Amy-D等，可以滿足絕大多數(shù)手性樣品分離需求,。各位小伙伴有手性樣品分離或需要篩選柱子,，歡迎聯(lián)系月旭售前技術(shù)熱線或當(dāng)?shù)劁N售。