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產(chǎn)品分類(lèi)品牌分類(lèi)

豬肉中氯霉素的測(cè)定

閱讀：1028 發(fā)布時(shí)間：2023/1/5

氯霉素（chloramphenicol，CAP）是一種廣譜性抗生素,，是某些微生物，如（Streptomyces venezuelae）的次生代謝產(chǎn)物，能有效地抗革蘭氏陽(yáng)性,、革蘭氏陰性、里克次氏體,、支原體,、衣原體等微生物。自1950年以來(lái),，氯霉素因方便適用,，價(jià)格便宜，而作為獸藥被廣泛的使用,。氯霉素因被發(fā)現(xiàn)對(duì)人體骨髓造血機(jī)能有抑制作用,，可引起人的粒細(xì)胞缺乏病，再生障礙性貧血和溶血性貧血,，甚至可導(dǎo)致食用者死亡,。

目前，檢測(cè)氯霉素的方法大致可分為篩選方法和確證方法,。

常用的篩選方法有微生物學(xué)方法,、放射免疫法和酶聯(lián)免疫法。微生物法靈敏度低,、反應(yīng)選擇性差,；放射免疫法存在同位素半衰期短、放射性污染等不足,；酶聯(lián)免疫法作為目前檢測(cè)氯霉素的主要方法,，又有假陽(yáng)性高、不能確證的缺點(diǎn),。

確證方法中氣質(zhì)聯(lián)用法需要對(duì)氯霉素分子中的兩個(gè)羥基進(jìn)行衍生化以提高其揮發(fā)性,，實(shí)驗(yàn)周期長(zhǎng)，步驟繁瑣,。LC-MS法具有定性,、定量準(zhǔn)確，檢測(cè)限低,，無(wú)需衍生化等優(yōu)點(diǎn),。

參考標(biāo)準(zhǔn)

GB 31658.2-2021 食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 動(dòng)物性食品中氯霉素殘留量的測(cè)定液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜法

提取步驟

稱(chēng)取樣品 5.00g于50mL離心管中,，加入4%氯化鈉溶液5mL，乙腈5mL,，渦旋2min,，8000 r/min，離心5min,，取上清液,，殘?jiān)貜?fù)提取1次，合并上清液,。加入正己烷5mL,，渦旋振蕩1min，4000r/min,，離心5min,，棄去上層液,，正己烷重復(fù)處理1次,。加水飽和的乙酸乙酯溶液5mL ，渦旋60s,，4000r/min,，離心5min，上層液轉(zhuǎn)移到15mL離心管中,，重復(fù)提取1次,，合并提取液，45℃氮?dú)獯蹈?，加?乙腈（95:5）3mL,，溶解，備用,。

取固相萃取柱Welchrom^® C18E 500mg 3mL,，依次用甲醇、水各10mL預(yù)洗,；

取備用液過(guò)柱,；

加水洗柱2次，每次3mL,；

加入4mL甲醇水（50:50）洗脫,，過(guò)柱流速為1滴/s；

加水飽和乙酸乙酯溶液4mL,，渦旋1min,，4000r/min，離心5min,，取上層液,，重復(fù)處理1次,，合并上層液，氮?dú)獯蹈?。流?dòng)相1mL溶解,，混勻，過(guò)0.22μm濾膜,，上機(jī),。

注：由于填料較厚，導(dǎo)致無(wú)法自然滴落,，需要使用真空泵,，保持1滴/s流速。

色譜條件

色譜柱：月旭Boltimate^® LP-C18 Core Shell (2.1×150mm,，2.7μm),。

流動(dòng)相：甲醇：水=50：50；

柱溫：30℃,；

流速：0.3 mL/min,；

進(jìn)樣量：5μL。