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圖｜蛋白純化填料

天然產(chǎn)物是指從動(dòng)物、植物及微生物中分離出來(lái)的生物二次代謝產(chǎn)物,，自從發(fā)現(xiàn)來(lái)自天然界的有機(jī)化合物具有特殊的生理活性后,，已經(jīng)開發(fā)出許多具有治療和保健作用的藥物。

由于天然產(chǎn)物往往含有結(jié)構(gòu),、性質(zhì)不同的多種成分,，且有效成分的含量一般較低。為了研究和開發(fā)天然產(chǎn)物,，就要選擇合適的層析填料,，從復(fù)雜的中草藥組成成分中提取、分離出有活性的單體純成分,。

產(chǎn)品介紹

葡聚糖凝膠LH-20通過(guò)葡聚糖凝膠 G-25的羥丙基化制備,，并且專門適合用于有機(jī)溶劑分離嗜脂性分子，天然產(chǎn)物在有機(jī)溶劑中的純化,，例如類固醇,，萜類化合物，脂質(zhì)和低分子量肽,。

 產(chǎn)品參數(shù)

葡聚糖凝膠 LH-20 的使用方法

將干粉浸泡于 60-70％乙醇中（充分?jǐn)嚢瑁?，洗去可能存在的殘留物，抽干然后濕態(tài)不間隙裝柱,，不能出現(xiàn)凝膠斷層（否則要重新裝柱），動(dòng)態(tài)用一倍柱體積的 60-70％乙醇淋洗,，再用水洗凈乙醇即根據(jù)自己選用洗脫液平衡層析柱至少兩個(gè)柱體積直到基線變得平穩(wěn)為止,，如改變?nèi)軇?yīng)該注意凝膠在新溶劑中的溶脹性質(zhì)，并根據(jù)性質(zhì)確定柱高,。如使用相同的溶劑,，在以后的層析中柱平衡可以省略。

葡聚糖凝膠 LH-20 洗脫溶劑

葡聚糖凝膠 LH-20 洗脫溶劑分為兩類：反相和正相兩種,。用得多的是反相溶劑洗脫,，以甲醇——水系統(tǒng)z為常見(jiàn),，先用水，逐漸增加甲醇比例,，后用 100％甲醇沖柱,。正相系統(tǒng)以lv仿——甲醇z為常見(jiàn)，先用 50％lv仿——甲醇,，逐漸增加甲醇比例,，后用 100％甲醇沖柱。

樣品的處理和洗脫溶劑的選擇

如果樣品極性大,，選用反相溶劑洗脫（甲醇——水）,，樣品用少體積的甲醇——水（盡可能甲醇少一些）溶解，過(guò)濾后,，濕法上樣（必須要進(jìn)行過(guò)濾,！否則把葡聚糖凝膠 LH-20 堵塞，就必須將葡聚糖凝膠 LH-20 的柱頭部分棄去,， 造成不必要的浪費(fèi)） ,。如果樣品極性小， 這選用正相溶劑洗脫 （lv仿——甲醇） ,，樣品用少體積的lv仿——甲醇溶解,，過(guò)濾后，濕法上樣,。

葡聚糖凝膠LH-20的分離技巧

（1）流速要控制好,，流速不可太快，為了快加壓,，分子篩效果會(huì)降低：過(guò)慢會(huì)導(dǎo)致樣品在柱子擴(kuò)散嚴(yán)重,，達(dá)不到分離效果。

（2）柱子盡可能長(zhǎng),，Tandex LH-20 柱長(zhǎng)的增加將ji大地改善分離,，所不要吝惜填料，寧可將填料全裝在一根大柱子中,，不要將填料裝成幾根小柱,。所謂集中優(yōu)勢(shì)兵力，打擊敵人,。

（3）餾分一定要接的細(xì),，可1／10，或1／20 個(gè)保留體積接成一餾分,。

（4） 洗脫體積一般為2-3個(gè)保留體積,，對(duì)特殊保留強(qiáng)的化合物，可洗脫5個(gè)保留體積,。

（5）如果黃酮類化合物粗提物中有鞣質(zhì),，那么你就要小心了,，Tandex LH-20對(duì)鞣質(zhì)幾乎是死吸附的。如果不考慮填料,，可用Tandex LH-20分鞣質(zhì),。

（6）填料反復(fù)使用，每次用完,，一般可用甲醇將柱子洗干凈,，然后用下一次分離的起步溶劑將甲醇替換出來(lái)。