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2020版中國藥典新增檢測項目——聚乙二醇分子量分布測定
新增項目
近在瀏覽國家藥典委員會網(wǎng)站的時候,，驚奇的發(fā)現(xiàn)聚乙二醇300，400,，1000……全部的聚乙二醇品種藥典方法都要修訂了,！在瀏覽了公示方法，發(fā)現(xiàn)原來是新增了一個項目,，從2020版藥典開始要標(biāo)明重均分子量及分子量分布系數(shù)的標(biāo)示值（按所附測定方法測定）,，那各位小伙伴了解分子量及分子量分布測定方法嗎？這里就給大家詳細講講。
2020版中國藥典征求意見稿之分子量及分子量分布測定方法
分別稱取聚乙二醇600,、聚乙二醇1000,、聚乙二醇4000、聚乙二醇7000,、聚乙二醇10000分子量對照品適量,，加流動相溶解并稀釋制成每1ml中約含2mg的溶液作為對照品溶液。稱取樣品適量,，加流動相溶解并稀釋制成每1ml中約含2mg的溶液作為供試品溶液,。照分子排阻色譜法（通則0514）測定，采用適宜分離范圍的凝膠色譜柱,，以0.1mol/L硝酸鈉溶液（含0.02%抑菌劑）為流動相,，示差折光檢測器；檢測器溫度35℃,，柱溫35℃,，取對照品溶液各100μl注入液相色譜儀，記錄色譜圖,，由GPC軟件計算回歸方程,，線性相關(guān)系數(shù)R應(yīng)不得小于0.99。取供試品溶液100μl,，同法測定,，根據(jù)回歸方程計算供試品的重均分子量及分子量分布。供試品的重均分子量應(yīng)為標(biāo)示值的90%～110%,，分布系數(shù)應(yīng)為產(chǎn)品標(biāo)示值的90%～110%,。
什么是分子排阻色譜法
分子排阻色譜法是根據(jù)待測組分的分子大小進行分離的一種液相色譜技術(shù)。分子排阻色譜法的分離原理為凝膠色譜柱的分子篩機制,。色譜柱多以親水硅膠,、凝膠或經(jīng)過修飾的凝膠如葡聚糖凝膠（Sephadex）和瓊脂糖凝膠（Sepharose）等為填充劑，這些填充劑表面分布著不同孔徑尺寸的孔,，藥物分子進入色譜柱后,，它們中的不同組分按其分子大小進入相應(yīng)的孔內(nèi)，大于所有孔徑的分子不能進入填充劑顆粒內(nèi)部,，在色譜過程中不被保留,，早被流動相洗脫至柱外，表現(xiàn)為保留時間較短,；小于所有孔徑的分子能自由進入填充劑表面的所有孔徑,，在色譜柱中滯留時間較長，表現(xiàn)為保留時間較長,；其余分子則按分子大小依次被洗脫,。
分子排阻色譜法應(yīng)用案例
月旭科技Xtimate® SEC色譜柱是硅膠基質(zhì)的分子排阻色譜柱,，其色譜填料為高純度、具有良好穩(wěn)定性的硅膠微球表面鍵合親水性聚合物,。月旭科技采用特殊的表面修飾技術(shù),，確保了該填料具有良好的穩(wěn)定性和批次重現(xiàn)性。
Xtimate® SEC色譜填料采用*的化學(xué)鍵合技術(shù),，在硅膠表面鍵合了親水性聚合物以及親水性二醇基官能團,，雙重鍵合機制使水溶性高分子聚合物蛋白、生物酶,、多肽等生物樣品的非特異性吸附極小,，因而可廣泛應(yīng)用于水溶性聚合物及生物大分子的分離和測定。
月旭科技采用Xtimate® SEC-300 （7.8*300mm,，5μm）兩根色譜柱串聯(lián)的方式成功分離檢測聚乙二醇40k，20k,，12k,，5k含量。
色譜柱：月旭Xtimate® SEC-300 （7.8*300mm,，5μm）兩根色譜柱串聯(lián)
流動相：高純水
檢測波長：示差檢測器
柱溫：柱溫40℃,，檢測器40℃
流速：1.0ml/min
進樣量：20μl
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