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液相色譜柱在使用過程中常見問題

液相色譜是一種的分析手段，液相色譜柱是色譜分析系統(tǒng)的“心臟”,，由于被分析樣品種類繁多,，加之樣品基質復雜，色譜柱極易被強保留物質污染,。這些強保留物質通常難以洗脫,，多次上樣后，聚集在柱頭端,，堵塞篩板,，甚至可能與填料發(fā)生相互作用導致填料變性，這會導致柱效下降,，分離度降低和峰型異常等現(xiàn)象,。因而液相色譜柱的維護是十分必要的。

正常的篩板                                                         堵塞的篩板

月旭科技液相色譜柱維護

液相色譜柱需要維護,，但是不同廠家的色譜柱維護方式各不相同,。月旭科技液相色譜柱推薦正向使用，反向沖洗,。因為月旭的色譜柱兩端用的篩板孔徑是一樣的,，不會存在反沖時把填料沖出來的情況。當做完樣品分析后,，絕大部分污染物都富集于柱頭端,，這個時候如果立即進行反沖可以很大程度上延長色譜柱填料壽命。

液相色譜柱如何反沖

液相色譜柱反沖時遵循的原則是用比流動相洗脫能力更強的溶劑沖洗,。

反相色譜柱（C18,、C8）可以選擇極性較小的溶劑反向沖洗，推薦如下沖洗方法：

水→甲醇→乙腈→異丙醇→二氯甲烷→異丙醇→乙腈

正相色譜柱（SiO2,， NH2,，CN,， DIOL）可以選擇極性較大的溶劑反向沖洗，沖洗方法如下：

正己烷→二氯甲烷→乙酸乙酯→異丙醇→乙腈→甲醇

如果流動相中含有緩沖鹽,，在運行序列過程中出現(xiàn)柱壓異常升高的現(xiàn)象,，則發(fā)生了緩沖鹽在色譜柱柱床上析出，推薦采用如下維護方法：

• 用甲醇/水＝10/90以分析流速35℃柱溫反向沖洗色譜柱60個柱體積,；

• 用甲醇/水＝10/90以0.2ml/min流速反向沖洗色譜柱過夜,。

含緩沖鹽的流動相正確使用方法：

例子：流動相中有緩沖鹽，嘗試用10%甲醇 0.2ml/min反向沖洗一晚上后柱效恢復正常,。

色譜柱：Ultimate XB-C18,， 4.6×250mm，5μm,。

波長  ：254nm,；

流動相：甲醇-水=75：25；

溫度  ：25℃,；

流速  ：1.0ml/min,；

進樣量：20μL。