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C18液相色譜柱在使用過(guò)程中須注意以下事項(xiàng)

閱讀:6671      發(fā)布時(shí)間:2018-7-29
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C18液相色譜柱在使用過(guò)程中,須注意以下事項(xiàng)
1,、C18液相色譜柱在使用前,,須先用甲醇或乙腈試劑以20倍柱體積低流速?zèng)_洗,作用是使固定相能充分潤(rùn)濕,、碳鏈?zhǔn)嬲?,,使色譜柱的性能達(dá)到更好狀態(tài)。具體操作是,,將配制好65%的乙腈/水沖洗后,,把色譜柱進(jìn)口端連接在色譜儀上,出口端放空(不可連上檢測(cè)器,以免污染了檢測(cè)器),,以0.1ml/min~0.5ml/min的低流速將色譜柱中的清稀溶液吹干,,過(guò)20分鐘后再接上檢測(cè)器,,以1.0ml/min的流速,,繼續(xù)沖洗2~8小時(shí);
 
2,、液相色譜儀檢測(cè)分析樣品完畢后,,須沖洗c18反相液相色譜柱。尤其是流動(dòng)相中含有酸或鹽時(shí),,需將c18反相液相色譜柱中的酸或鹽沖洗干凈,,通常建議用10%甲醇水沖洗20倍柱體積;
 
3,、若C18液相色譜柱處于長(zhǎng)期閑置狀態(tài)時(shí),,要將色譜柱*沖洗,建議沖洗3-4小時(shí)以上,,后保存在純有機(jī)試劑或高比例的有機(jī)試劑溶液中,;
 
4、由于c18反相液相色譜柱的固定相疏水性較強(qiáng),,在使用過(guò)程中盡量不要使用高水相條件,,若水相比例過(guò)高易引起固定相疏水塌陷,引起柱效迅速下降,,甚至造成不可逆的負(fù)面影響,;由于碳載量高,表現(xiàn)尤為明顯,,建議使用過(guò)程中水相比例不超過(guò)90%,;
 
5、C18液相色譜柱壓力升高,、柱性能下降:通常為色譜柱被污染,,對(duì)色譜柱進(jìn)行再生處理可恢復(fù)部分柱效;
 
6,、C18液相色譜柱壓力驟升:通常由鹽析出或篩板堵塞引起,,若是鹽析出,用10%甲醇水低流速?zèng)_洗至壓力恢復(fù)即可,;若判斷并非鹽析出,,以純甲醇或10%甲醇水為流動(dòng)相反沖色譜柱(將色譜柱反接,不接檢測(cè)器),,若反沖半小時(shí)仍無(wú)效果則說(shuō)明反沖無(wú)效,,需尋找其他原因。

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