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辣椒醬中羅丹明B的測(cè)定
適用于辣椒醬中羅丹明B的檢測(cè),。
2、檢測(cè)原理
采用非極性有機(jī)溶劑（正己烷+丙酮）將羅丹明B從辣椒醬中溶解并提取,，提取液過(guò)中性氧化鋁SPE小柱吸附羅丹明B,，然后用非極性有機(jī)溶劑（正己烷+丙酮）洗脫樣品油脂和內(nèi)源性干擾物，再用極性有機(jī)溶劑（甲醇-水）將羅丹明B從小柱上洗脫,，供儀器分析
3,、提取步驟
取辣椒醬1g，置入15ml離心管中,，加入10ml 20%丙酮-正己烷溶液,，超聲提取 10 min，離心后取上清液,。重復(fù)提取兩次,，合并三次提取的上清液，待SPE凈化,。
4,、SPE柱凈化過(guò)程
SPE柱：月旭Welchrom®羅丹明B專用固相萃取柱，3g/6mL
1）活化：10ml 20% 丙酮-正己烷溶液；
2）上樣：將提取好的樣品溶液加入小柱中,，流速不宜過(guò)快,；
3）淋洗：30ml 20%丙酮-正己烷淋洗至過(guò)柱流出液體為無(wú)色，棄去流出液,，抽干小柱,，
4）洗脫：10ml 80%甲醇-水溶液，收集洗脫液,，用80%甲醇-水溶液定容至10mL,，上機(jī)測(cè)定。
注意：
1）進(jìn)行加標(biāo)回收率實(shí)驗(yàn)時(shí),，往1g辣椒醬中加入40mg/mL 的標(biāo)液0.125mL,；
2）配置25ml 40mg/ml羅丹明B標(biāo)準(zhǔn)溶液，用20%丙酮正己烷無(wú)法溶解,，需加入2ml甲醇助溶解,。
3）將上清液加入月旭Welchrom®羅丹明B專用固相萃取柱中，含羅丹明B的樣品提取液在柱上部會(huì)出現(xiàn)鮮亮的粉紅色的熒光條帶,，且粉紅條帶隨含量的增加而加深和加寬,，不含羅丹明B的樣品提取液不會(huì)出現(xiàn)粉紅色條帶，只會(huì)出現(xiàn)黃紅色的不清晰的寬帶,；
4）用含20%丙酮-正己烷淋洗小柱,，粉紅色的條帶不下移，但更清晰,，其余的黃紅色帶下移可大部分被洗脫出,，可判斷為含羅丹明B的可疑樣品；
5）待洗柱的流出液無(wú)色時(shí),，使用10ml 80%甲醇-水溶液洗脫，將羅丹明B色帶洗下并收集,。
6）羅丹明B標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)液相時(shí)用80%甲醇-水溶液稀釋上機(jī),；
7）過(guò)柱速率不能太快，否則回收率不理想,；
5,、色譜條件
色譜柱：月旭Ultimate XB-C18, 4.6×150 mm, 5µm；
流動(dòng)相：75%甲醇-水溶液,；
流速： 1.0mL/min
柱溫： 30℃
檢測(cè)波長(zhǎng)：550nm
進(jìn)樣量： 20µL
6,、色譜圖或者加標(biāo)回收率結(jié)果