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當前位置:上海炎熙生物科技有限公司>>支原體>>支原體檢測>> Mqs-hae-20染料法嗜血支原體通用實時定量PCR試劑盒
產(chǎn)品型號Mqs-hae-20
品 牌其他品牌
廠商性質(zhì)生產(chǎn)商
所 在 地上海市
更新時間:2024-09-12 13:19:03瀏覽次數(shù):185次
聯(lián)系我時,請告知來自 化工儀器網(wǎng)供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 20次反應 |
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貨號 | Mqs-hae-20 | 應用領域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,食品,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)業(yè),制藥 |
主要用途 | 用于嗜血支原體的通用檢測 |
Dye-quantitative Real-time PCR Kit for Universal Hemoplasma
貨號:Mqs-hae-20 規(guī)格:20個反應
貨號:Mqs-hae-50 規(guī)格:50個反應
貨號:Mqs-hae-100 規(guī)格:100個反應
儲存:-20度,,避光保存,,保質(zhì)期一年。避免反復凍融,。
1,,可作為嗜血支原體通用試劑盒使用,可檢測絕大部分目前已知的嗜血支原體,。
2,,使用熱啟動的Taq酶,可抑制非特異性擴增,,降低背景熒光,。
3,帶有陽性對照樣品,,可用于檢驗試劑盒有效性,,以及驗證待測樣品中是否含有PCR抑制劑。
4,,帶有ROX參比染料,,幫助校正加樣誤差和管間差異。
5,,帶有UDG酶和dUTP,,可降低殘留DNA的污染。
6,,本試劑盒靈敏度高,,可檢出反應液中最少達1-10個基因組。
嗜血支原體(Hemotropic mycoplasmas,,或hemoplasmas)寄生于多種哺乳動物血液中,,附著于紅細胞表面,,無細胞壁,具多形性,,可通過血液傳播,。嗜血支原體曾被命名為血巴爾通體/血巴通氏體(Haemobartonella)和 附紅細胞體(Eperythrozoon),分類為立克次氏體屬,,現(xiàn)已重新歸類為支原體屬,。臨床上嗜血支原體可引發(fā)溶血性貧血癥,其他癥狀還包括:厭食癥,、昏睡癥,、脫水、體重減輕,、突然死亡等,,有時表現(xiàn)為急性發(fā)作,也有很多動物感染后癥狀輕微或無癥狀,。不同種動物感染的嗜血支原體有遺傳相似性,,提示有跨物種傳播的可能性。目前已在貓,、狗,、豬、牛,、羊,、駝、鼠等動物中發(fā)現(xiàn)嗜血支原體,,很多動物的血液支原體感染仍為未知狀態(tài),。
嗜血支原體尚不能體外培養(yǎng),一般采用PCR法在血液或組織樣本中檢測,。常規(guī)PCR方法較為繁瑣,,耗時較長,較易產(chǎn)生非特異性擴增,;探針法實時定量PCR具有更強的特異性,,較少受到殘留DNA的污染,較難識別未知物種,;SYBR法實時定量PCR可兼具二者的優(yōu)點,通過熔解曲線來區(qū)分不同的PCR產(chǎn)物,,提高檢測的特異性,,相較探針法,又可在一定程度上識別未知物種,。
染料法嗜血支原體通用實時定量PCR試劑盒采用SYBR染料法,,根據(jù)嗜血支原體的16S rRNA基因序列,,設計通用引物,可識別寄生于常見哺乳動物(如:貓,、犬,、豬、牛,、羊,、鼠等)的所有已知嗜血支原體。通過BLAST驗證,,本試劑盒與非嗜血支原體的其他物種無交叉反應,,個別物種可能產(chǎn)生的非特異信號可通過Tm值輕易排除。使用本試劑盒對320個貓血樣進行檢測,,獲得139個陽性,。對擴增產(chǎn)物進行測序,證實為嗜血支原體特異性擴增,,其中包括貓的全部三種嗜血支原體,。
本試劑盒可識別的嗜血支原體包括:Mycoplasma haemofelis、Candidatus Mycoplasma haemominutum,、Candidatus Mycoplasma turicensis,、Mycoplasma haemocanis、Candidatus Mycoplasma haematoparvum,、Mycoplasma suis,、Mycoplasma wenyonii、Candidatus Mycoplasma haemobos,、Mycoplasma ovis,、Mycoplasma haemomuris、Mycoplasma coccoides,、Candidatus Mycoplasma haemolamae,、Mycoplasma erythrodidelphis、Candidatus Mycoplasma kahanei等,。
下表列出已知的可識別嗜血支原體種類:
支原體 | 宿主 | 支原體 | 宿主 |
Candidatus Mycoplasma haemohominis | 人 | Mycoplasma wenyonii | 牛 |
Mycoplasma coccoides | 鼠 | Candidatus Mycoplasma haemobos | 牛 |
Candidatus Mycoplasma haemomuris | 鼠 | Mycoplasma ovis | 羊 |
Mycoplasma haemofelis | 貓 | Candidatus Mycoplasma haemovis | 羊 |
Candidatus Mycoplasma turicensis | 貓 | Candidatus Mycoplasma erythrocervae | 鹿 |
Candidatus Mycoplasma haemominutum | 貓 | Candidatus Mycoplasma haemocervae | 鹿 |
Mycoplasma haemocanis | 犬 | Candidatus Mycoplasma kahanei | 猴 |
Candidatus Mycoplasma haematoparvum | 犬 | Candidatus Mycoplasma haemomacaque | 猴 |
Mycoplasma suis | 豬 | Mycoplasma erythrodidelphis | 負鼠 |
Mycoplasma parvum | 豬 | Mycoplasma haemozalophi | 海獅 |
Candidatus Mycoplasma haemolamae | 羊駝 | Candidatus Mycoplasma haemomeles | 獾 |
本試劑盒包含熱啟動Taq酶,、dNTP(以UTP代替了TTP)、引物,、陽性對照品,、SYBR Green I染料、ROX染料,,和用以防止殘余DNA污染的UDG(尿嘧啶-N-糖苷酶),,用戶只需準備好DNA樣品即可使用。
本產(chǎn)品僅供研究使用,。
相關小知識:
熱啟動Taq酶結(jié)合了特異性單克隆抗體的DNA聚合酶,,在室溫下聚合酶活性被抗體抑制,。在PCR循環(huán)的變性階段,抗體受熱被去除,,聚合酶活性恢復,,因此獲得“熱啟動"功能,可減少殘余DNA的污染,,提高PCR擴增效率,、靈敏度和目的片段產(chǎn)量。
SYBR Green I可以與DNA雙鏈的小溝結(jié)合,,結(jié)合后在497nm激發(fā)光照射下產(chǎn)生520nm的發(fā)射光,。未結(jié)合雙鏈DNA的SYBR Green I基本不產(chǎn)生熒光。因此可以根據(jù)熒光值的大小判斷溶液內(nèi)DNA雙鏈的多寡,,用于實時檢測PCR反應過程中產(chǎn)物的累積量,。初始模板濃度越高,反應循環(huán)數(shù)越高,,則雙鏈DNA含量越高,,熒光值也就越高。值得注意的是,,SYBR Green I也可以結(jié)合非特異性PCR產(chǎn)物以及引物二聚體,,此時產(chǎn)生的熒光與目標擴增產(chǎn)物無法區(qū)分。為了判斷熒光信號是否來自目標擴增產(chǎn)物,,可以繪制熔解曲線,。通過逐步緩慢升溫,使雙鏈DNA解離為單鏈DNA,,同時檢測熒光值的變化,,繪制曲線,根據(jù)熒光值觀察DNA解鏈的溫度,。
UDG和dUTP可以阻止前次步驟殘余DNA的擴增,。dUTP可以確保擴增后的DNA中均含有尿嘧啶。UDG可從單鏈或雙鏈DNA上去除尿嘧啶殘基,,從而阻止含有尿嘧啶的DNA作為下幾輪PCR的模板,。在PCR循環(huán)開始前的UDG孵育步驟,可以破壞帶有尿嘧啶的PCR產(chǎn)物,。經(jīng)過該去除污染步驟后,,UDG在正常的PCR循環(huán)過程中被高溫滅活,對PCR反應沒有影響,。
ROX不參與PCR反應,,在PCR反應過程中熒光沒有變化,可以提供一條基線用于校正加樣誤差和管間差異,,便于儀器自動分析報告熒光與內(nèi)參ROX熒光的比值,,使定量更準確。ROX染料的激發(fā)波長為584nm,,發(fā)射波長為612nm,。用ROX進行校正后可以使實驗誤差減小十倍左右。
相關產(chǎn)品:
嗜血支原體通用PCR檢測試劑盒,,貨號:M-hemo-20,,M-hemo-50,M-hemo-100
探針法Candidatus Mycoplasma haemolamae實時定量PCR試劑盒,,貨號:Mqt-hla-20,,Mqt-hla-50,Mqt-hla-100
豬支原體PCR檢測試劑盒,,貨號:M-suis-20,,M-suis-50,M-suis-100
染料法豬支原體實時定量PCR試劑盒,,貨號:Mqs-sui-20,,Mqs-sui-50,Mqs-sui-100
維容氏支原體PCR檢測試劑盒,,貨號:M-weny-20,,M-weny-50,M-weny-100
探針法維容氏支原體實時定量PCR試劑盒,,貨號:Mqt-wen-20,,Mqt-wen-50,Mqt-wen-100
探針法Candidatus Mycoplasma haemobos實時定量PCR試劑盒,,貨號:Mqt-hbo-20,,Mqt-hbo-50,Mqt-hbo-100
羊附紅細胞體PCR檢測試劑盒,,貨號:M-ovis-20,,M-ovis-50,M-ovis-100
染料法羊支原體實時定量PCR試劑盒,,貨號:Mqs-ovi-20,,Mqs-ovi-50,Mqs-ovi-100
貓血支原體PCR檢測試劑盒,,貨號:M-hfel-20,,M-hfel-50,M-hfel-100
染料法貓血支原體實時定量PCR試劑盒,,貨號:Mqs-hfe-20,,Mqs-hfe-50,Mqs-hfe-100
探針法貓血支原體實時定量PCR試劑盒,,貨號:Mqt-hfe-20,,Mqt-hfe-50,,Mqt-hfe-100
染料法Candidatus Mycoplasma turicensis實時定量PCR試劑盒,貨號:Mqs-tur-20,,Mqs-tur-50,,Mqs-tur-100
探針法Candidatus Mycoplasma turicensis實時定量PCR試劑盒,貨號:Mqt-tur-20,,Mqt-tur-50,,Mqt-tur-100
染料法Candidatus Mycoplasma haematoparvum實時定量PCR試劑盒,貨號:Mqs-hpa-20,,Mqs-hpa-50,,Mqs-hpa-100
探針法Candidatus Mycoplasma haematoparvum實時定量PCR試劑盒,貨號:Mqt-hpa-20,,Mqt-hpa-50,,Mqt-hpa-100
Candidatus Mycoplasma haemominutum PCR檢測試劑盒,貨號:M-hmin-20,,M-hmin-50,,M-hmin-100
染料法Candidatus Mycoplasma haemominutum實時定量PCR試劑盒,貨號:Mqs-hmi-20,,Mqs-hmi-50,,Mqs-hmi-100
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