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AN54L017/AN54L018-PikoGreen dsDNA定量試劑盒(Broad Range
  • AN54L017/AN54L018-PikoGreen dsDNA定量試劑盒(Broad Range

貨物所在地:上海上海市

地: 上海

更新時間:2025-01-17 18:41:38

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PikoGreen dsDNA定量試劑盒(Broad Range)是一種極為靈敏的雙鏈DNA熒光染料,,于雙鏈DNA的定量,。測定DNA濃度在cDNA文庫構(gòu)建、DNA亞克隆,、PCR產(chǎn)物估測等領(lǐng)域中非常重要,,另外疫苗等生物制品中殘留微量DNA的檢測因關(guān)系人身健康,顯得尤為重要,。

產(chǎn)品描述
        PikoGreen是一種極為靈敏的雙鏈DNA熒光染料,,僅與DNA雙鏈結(jié)合后才發(fā)出熒光,且所產(chǎn)生的熒光與DNA濃度呈正比,,在存在ssDNA,、RNA和單體核苷酸的條件下,可以選擇性地檢測低至25 pg/mL的dsDNA。與傳統(tǒng)DNA定量方法相比,,具有如下優(yōu)點:

  • 靈敏:數(shù)量級較UV吸光讀數(shù)更敏感,,可節(jié)省樣品。

  • 特異性強(qiáng):只結(jié)合dsDNA,,特異性強(qiáng),,不受樣品常規(guī)污染影響。傳統(tǒng)紫外吸光法容易受樣品中存在的單鏈DNA,,蛋白,,RNA等影響。

  • 耐受性好:耐受較高濃度的鹽,、尿素,、乙醇、氯仿,、去垢劑,、蛋白或瓊脂糖,可以直接定量PCR擴(kuò)增產(chǎn)物而無需從反應(yīng)混合物中純化DNA,。

  1. 線性范圍寬:PikoGreen dsDNA染料測定DNA濃度,,在100 pg/mL~100 ng/mL范圍內(nèi)呈良好線性。

  2. 方便操作:在樣品中加入染料,,染色5~6 min,,然后讀數(shù)即可,且適用于96和384孔板,。與大多數(shù)基于熒光的酶標(biāo)儀兼容,。  

  本產(chǎn)品可適用于各種DNA樣品分析、PCR的分析,、芯片樣品,、DNA損傷分析、酶活性分析,、基因組DNA定量以及復(fù)雜混合物中dsDNA的檢測和病毒DNA定量等多種領(lǐng)域,。

訂購信息

產(chǎn)品名稱貨號規(guī)格
PikoGreen dsDNA定量試劑盒(Broad Range)AN54L017200 assay
PikoGreen dsDNA定量試劑盒(Broad Range)AN54L0181000 assay

產(chǎn)品組分

組分AN54L017(200 assay)AN54L018(1000assay)
A:1×定量緩沖液50 mL250 mL
B:Piko Green Dye 100 × in DMSO反應(yīng)液0.5 mL2.5 mL
C:100×反應(yīng)增強(qiáng)液0.5 mL2.5 mL
D: dsDNA 標(biāo)準(zhǔn)品9 x 0.5 mL(0 , 2, 6.25, 12.5 , 25, 50 , 100, 150 and 200 ng/μL9管(每管0.1 mL)9管(每管0.5 mL)

保存方法
      冰袋運(yùn)輸,4℃避光干燥保存,,保質(zhì)期36個月。如果較長時間不用,,建議把組分C與組分D放置于-20℃保存,。
使用方法

(以96孔板為例)

1.使用前,將產(chǎn)品從儲存條件下取出恢復(fù)至室溫,。PikoGreen提供的是DMSO溶液,,在4℃存放時成固體,可37℃水浴溶解。每個組分應(yīng)充分震蕩或渦旋混勻,、離心,,以免造成不必要的試劑損耗。

2.分別吸取19.6 mL組分A,, 200 μL組分B,, 200 μL組分C配制成20 mL1×PikoGreen工作液。新配工作液應(yīng)在1 h內(nèi)使用,,工作液存放重新使用時須重懸,,以免染料沉淀,工作液存放24 h,,會輕微影響定量結(jié)果,。

3.每個樣品,吸取200 μL 的工作液至黑色的96孔板微孔中,。為確保結(jié)果精確可靠,,建議每個測試樣品和DNA標(biāo)樣分別做平行的3個復(fù)孔。

黑色的檢測板可以減少各測試樣品間的熒光干擾,。

4.96孔板微孔中,,分別加入dsDNA標(biāo)樣或待測樣品各10 μL,并用移液器輕輕混勻,。

5.將微孔板室溫避光孵育10分鐘,,在Ex(nm):350,  Em(nm):460處用酶標(biāo)儀測量熒光值。

6.制作標(biāo)準(zhǔn)曲線,,計算樣品濃度,。


注意事項
1.為了得到最佳結(jié)果,請使用精確校準(zhǔn)的移液器和去RNA酶的槍頭,、試管以及檢測板,。
2. 建議檢測時每個DNA標(biāo)樣和未知樣品都設(shè)定3個復(fù)孔。如果檢測時不只一塊96孔板,,建議每塊96孔板都設(shè)定一條標(biāo)準(zhǔn)曲線,,盡量減少檢測板之間的誤差。

3. 為得到最佳結(jié)果,,檢測板應(yīng)在一小時內(nèi)讀取完畢,。如果將反應(yīng)液重新儲存并在24 h內(nèi)讀取數(shù)據(jù),結(jié)果的精確性會有輕微損失,。











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